美國NovaBios基孔肯雅熱診斷試劑盒(美國CDC使用)
廣州健侖生物科技有限公司
本公司專業供應各種進口品牌基孔肯雅熱檢測試劑盒,包括美國的NovaBios、德國NOVA、廣州創侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學。歡迎咨詢
基孔肯雅熱IgM診斷試劑
基孔肯雅熱IgG診斷試劑
基孔肯雅熱ELISA檢測試劑
基孔肯雅熱快速檢測試劑
基孔肯雅病毒核酸檢測試劑盒(熒光探針PCR)
美國CDC的基孔肯雅病毒診斷試劑——美國的NovaBios
德國CDC使用的基孔肯雅病毒診斷試劑——德國NOVA
美國NovaBios基孔肯雅熱診斷試劑盒(美國CDC使用)
【預期用途】
基孔肯雅IgG/IgM抗體ELISA檢測試劑盒主要用于定性檢測人血清和血漿中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗體。
【實驗原理】
此試劑盒基于ELISA技術。包被板中包被了抗人IgG抗體,如果人血清或血漿中含有IgG時,則會與其特異性結合,洗板將未結合的物質洗去, 然后加入基孔肯雅抗原溶液,洗板洗去未結合的物質,然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯物。洗板后,加入TMB底物液,顏色變成藍色,加入終止液終止反應,顏色由藍色轉為黃色,zui后用酶標儀在450nm處讀數。
【試劑組成】
包被板:12×8可拆卸,包被了抗人IgG抗體,密封在可重封鋁箔袋中
基孔肯雅溶液1:1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液,即用,白蓋
基孔肯雅溶液2:1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體,即用,藍色,白蓋
基孔肯雅IgM陽性質控:1瓶,1.5mL,黃色,即用,紅蓋
基孔肯雅IgM臨界質控:1瓶, 2mL,黃色,即用,綠蓋
基孔肯雅IgM陰性質控:1瓶,1.5mL,黃色,即用,藍蓋
樣本稀釋液: 1瓶包含100mL的即用緩沖液,用于稀釋樣本,pH7.2±0.2,黃色,白蓋
洗滌液:1瓶,包含50mL 20倍濃縮的緩沖液,(pH7.2±0.2)用于洗板,白蓋
鏈霉親和素結合液:1瓶包含6mL過氧化物酶結合的鏈霉親和素,即用,紅色,黑蓋
TMB底物液:1瓶包含15mL TMB,即用,黃蓋
終止液:1瓶包含15mL,即用,內含硫酸,0.2mol/l,紅蓋
【需要的設備和材料】
固定板
封板片
酶標儀(450/620nm)
37℃孵箱
洗瓶或自動洗板機
10~1000μL的移液器
漩渦混勻器
蒸餾水或去離子水
一次性試管
計時器
【儲存和穩定性】
試劑在有效期內,儲存于2-8℃穩定
【試劑準備】
洗滌液的準備
用雙蒸水稀釋洗滌液,例子:10ml洗滌液+190ml雙蒸水。稀釋好的洗滌液在室溫下5天內有效。
【樣本的采集和準備】
這個實驗中使用的樣本是人血清和血漿,如果實驗在樣本采集后的5天內進行,則需要儲存在2-8℃,否則,必須于-20℃到-70℃深度凍存。如果樣本是深度凍存的,在使用前,則需要充分混勻,避免反復凍融。 不推薦使用熱滅活的樣本
【樣本的稀釋】
將10μL樣本跟1ml的樣本稀釋液混勻,并用漩渦混勻器充分混勻。
【實驗步驟】
在開始試驗前,請仔細閱讀試驗說明。結果的可信度是依賴于嚴格地按照實驗說明來進行的,鋪板時zui少留1個孔為空白對照(A1)1個陰性質控孔(B1)2個臨界質控孔(C1+D1)1個陽性質控孔(E1)。開始試驗前,請將所有試劑都平衡到室溫
1. 吸取50μL的質控品和稀釋過的樣本到相應的孔中,留A1孔做空白對照孔
2. 封板
3. 在37±1℃下孵育1小時±5分鐘
4. 當孵育完成時,揭去封板片,棄去反應液,每孔300μL洗滌液,洗板3次,避免溢出。每孔浸泡的時間都必須>5秒,zui后拍板將殘留的液滴都拍去。
5. 吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白對照孔的每個孔中,蓋板
6. 在室溫孵育30分鐘
7. 重復步驟4
8. 將基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素結合物混勻10分鐘
9. 吸取50μL基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素的復合物到除了空白對照孔的每個孔中,蓋板。
10. 室溫孵育30分鐘
11. 重復步驟4
12. 吸取100μL的TMB底物液到每個孔中
13. 避光孵育15分鐘(精確)
14. 加入100μL終止液到每個孔中,與加TMB底物液時的間隔和順序都必須一樣
15. 用酶標儀在加入終止液后30分鐘內與450/620nm處檢測
【檢測】
調整酶標儀,以空白對照孔調零,以450nm處檢測所有孔的吸光度值。
【結果】
1. 檢測生效的條件
只有以下條件符合,檢測的結果才能認為的有效的
空白對照孔 吸光度值<0.100
陰性質控孔 吸光度值<臨界質控
臨界質控孔 吸光度值0.150-1.300
陽性質控孔 吸光度值>臨界質控
如果以上條件不符合的,那么試驗結果則是無效的,需要重新檢測
2. 結果的計算
臨界質控平均吸光度值的計算,例子:吸光度1:0.39;吸光度2:0.37
(0.39+0.37)/2=0.38
平均吸光度值為0.38
3. 結果的說明
樣本如果是比臨界值高出10%,則認定為陽性,
樣本如果是在臨界值上下10%之內,則認定為灰色區(推薦在2-4周之后再次檢測新鮮的樣本,如果樣本仍然是灰色區,可以直接認為是陰性)
樣本如果是比臨界值低出10%,則認定為陰性
4. 結果的單位
病人樣本平均吸光度值×10 = U
臨界值
例子: 1.216×10 =32U
0.38
臨界值: 10 U
灰色區:9-11 U
陰性: <9 U
陽性: >11 U
美國NovaBios
臨床表現/基孔肯雅熱 基孔肯雅熱
感染“基孔肯雅”病毒的留尼旺島居民出現嚴重蛻皮癥狀
感染“基孔肯雅”病毒的留尼旺島居民出現嚴重蛻皮癥狀基孔肯雅熱
本病的潛伏期為2~12天,通常為3~7天。
急性期
1. 發熱: 病人常突然起病,寒戰、發熱,體溫可達39℃,伴有頭痛、基孔肯雅熱、嘔吐、食欲減退,淋巴結腫大。一般發熱1~7天即可退熱,有的病人約3天后再次出現較輕微發熱(雙峰熱),持續3~5天恢復正常。有些患者可有結膜充血和輕度畏光的結膜炎表現。
2. 皮疹: 80%的患者在發病后2~5天,軀干、四肢的伸展側、手掌和足底出現皮疹,為斑疹、丘疹或紫癜 ,疹間皮膚多為正常 ,部分患者伴有瘙癢感。數天后消退,可伴有輕微脫屑。
3. 關節疼痛: 發熱同時,多個關節和脊椎出現疼痛、關節腫脹,可伴有全身性肌痛。關節痛多為游走性,隨運動加劇,晨間較重。病情發展迅速,往往在數分鐘或數小時內關節功能喪失,不能活動。主要累及小關節,如手、腕、踝和趾關節等,也可能涉及膝和肩等大關節,腕關節受壓引起的劇烈疼痛是本病的特點。關節積液少見。X線檢查正常。
4.其他: 極少數患者可出現腦膜腦炎、肝功能損傷、心肌炎及皮膚黏膜出血。
恢復期
急性期后,絕大多數患者的關節疼痛及僵硬狀態可*恢復。部分患者持續性關節疼痛和僵硬可達數周至數月,甚至3年以上。
個別患者留有關節功能受損等后遺癥。
檢查/基孔肯雅熱 基孔肯雅熱
一般檢查
法國科學家正在研究名為“基孔肯雅”的病毒
法國科學家正在研究名為“基孔肯雅”的病毒基孔肯雅熱
1. 血常規檢查:白細胞計數多為正常,少數患者白細胞總數及淋巴細胞減少、血小板輕度降低。
2. 生化檢查:部分患者血清ALT、AST、肌酸激酶(CK)升高。
3. 腦脊液檢查:腦膜腦炎患者腦脊液檢查符合病毒性損傷的改變。
血清學檢查
1. 血清特異性IgM抗體:采用ELISA、免疫層析等方法檢測,捕獲法檢測IgM抗體的結果較為可靠。一般情況下,發病后第1天出現IgM抗體,第5天多數患者呈陽性。
2. 血清特異性IgG抗體:采用ELISA、免疫熒光抗體測定(IFA)、免疫層析等方法檢測。一般情況下,發病后第2天出現IgG抗體,第5天多數患者呈陽性。
病原學檢查
1. 核酸檢測:采用RT-PCR和Real-time PCR等核酸擴增方法檢測。一般發病后4天內在多數患者的血清中可檢測到病毒核酸。
2. 病毒分離:采集發病2天內患者血清標本,用Vero、C6/36、BHK-21和HeLa等敏感細胞進行病毒分離。
診斷/基孔肯雅熱 基孔肯雅熱
診斷依據
1. 流行病學資料:生活在基孔肯雅熱流行地區或12天內有疫區旅行史,發病前12天內有蚊蟲叮咬史。
2. 臨床表現:急性起病,以發熱為*癥狀,病程2~5天出現皮疹,多個關節劇烈疼痛。
3. 實驗室檢查:(1)血清特異性IgM抗體陽性;(2)恢復期血清特異性IgG抗體滴度比急性期有4倍以上增高;(3)從患者標本中檢出基孔肯雅病毒RNA;(4)從患者標本中分離到基孔肯雅病毒。
診斷標準
美國NovaBios
我司還提供其它進口或國產試劑盒:登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。
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Where Has Chikungunya Virus Been Found?
Prior to 2013, chikungunya virus outbreaks had been identified in countries in Africa, Asia, Europe, and the Indian and Pacific Oceans.
In late 2013, the first local transmission of chikungunya virus in the Americas was identified in Caribbean countries and territories. Local transmission means that mosquitoes in the area have been infected with the virus and are spreading it to people.
Since then, local transmission has been identified in 45 countries or territories throughout the Americas with more than 1.7 million suspected cases reported to the Pan American Health Organization from affected areas (Updated data from PAHO).
For information on current outbreaks, consult CDC’s Traveler’s Health website.
Click here for more information on chikungunya in the United States.
Through mosquito bites
Chikungunya virus is transmitted to people through mosquito bites. Mosquitoes become infected when they feed on a person already infected with the virus. Infected mosquitoes can then spread the virus to other people through bites.
Chikungunya virus is most often spread to people by Aedes aegypti and Aedes albopictus mosquitoes. These are the same mosquitoes that transmit dengue virus. They bite during the day and at night.
Rarely, from mother to child
Chikungunya virus is transmitted rarely from mother to newborn around the time of birth.
To date, no infants have been found to be infected with chikungunya virus through breastfeeding. Because of the benefits of breastfeeding, mothers are encouraged to breastfeed even in areas where chikungunya virus is circulating.
Rarely, through infected blood
In theory, the virus could be spread through a blood transfusion. To date, there are no known reports of this happening.
Chikungunya Nowcast for the Americas
What are public health models used for?
In recent years, infectious disease modeling has been increasingly used to help public health experts identify and understand factors that influence when and where outbreaks occur and to what extent they may spread. By helping us identify factors that influence introduction of viruses to specific geographic locations we can better design methods to prevent virus transmission.
What does this nowcast model predict?
This monthly nowcast was developed to help CDC scientists estimate:
Where travelers infected with chikungunya virus are likely to arrive;
And, which locations are at risk of having new local transmission of chikungunya virus.
Why doesn’t the nowcast predict spread of the virus into the future?
CDC developed the model to provide information on the continuously moving front of the epidemic rather than to predict spread of the virus into the future. Predictions into the future would require a different type of model.
How should estimates from the chikungunya nowcast be used?
The nowcast model estimates helps to identify when and where chikungunya spread is likely. This information can be used for planning and timing outreach programs to the public, media, and to health care providers. These activities can raise awareness in the public and medical community, which can lead to early recognition of cases or potential outbreaks in the area. Key education and outreach should focus on:
Raising awareness of chikungunya in the community;
Recognizing the signs and symptoms of chikungunya;
Encouraging the public to seek medical care if/when sick;
Educating the public about how to protect themselves from chikungunya;
Planning and implementing disease surveillance activities; and
Planning and implementing mosquito control activities.