美國(guó)NovaBios黃熱病檢測(cè)試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
本公司專業(yè)供應(yīng)各種進(jìn)口品牌黃熱病檢測(cè)試劑盒,包括美國(guó)的NovaBios、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢
黃熱病毒IgM檢測(cè)試劑
黃熱病毒IgG檢測(cè)試劑
黃熱病ELISA檢測(cè)試劑
黃熱病快速檢測(cè)試劑
黃熱病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光探針PCR)
美國(guó)CDC的黃熱病毒診斷試劑——美國(guó)的NovaBios
美國(guó)NovaBios黃熱病檢測(cè)試劑盒
【黃熱病簡(jiǎn)介】
黃熱病,歷*稱為黃色杰克,黃色瘟疫或青銅約翰,是一種急性病毒性疾病。在大多數(shù)情況下,癥狀包括發(fā)熱,寒戰(zhàn),食欲不振,特別是在背部的肌肉痛,和頭痛。癥狀通常在五天內(nèi)改善。在一些人在一天內(nèi)改善,發(fā)燒回來,腹痛發(fā)生,肝損傷開始導(dǎo)致黃色皮膚。如果發(fā)生這種情況,出血和腎臟問題的風(fēng)險(xiǎn)也增加。
【檢測(cè)原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特異性抗原。將對(duì)照或測(cè)試樣品加入到合適的孔中并孵育。用洗滌緩沖液洗去游離組分。將HRP綴合的檢測(cè)試劑加入到孔中。TMB底物用于顯現(xiàn)HRP酶反應(yīng)。TMB由HRP催化以產(chǎn)生在加入酸性停止溶液后變?yōu)辄S色的藍(lán)色產(chǎn)物。黃色的密度與板中捕獲的樣品的YFV-IgM/IgG量成比例。外徑在微板讀數(shù)器中在450nm下通過分光亮度計(jì)測(cè)量吸亮度,然后可以計(jì)算YFV-IgM/IgG的濃度。
產(chǎn)品規(guī)格:96T/盒
檢測(cè)范圍:定性
靈敏度:定性
儲(chǔ)存和使用期:2-8℃ 儲(chǔ)存12個(gè)月
產(chǎn)品應(yīng)用:用于定性檢測(cè)人血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液或任何生物液體中的YFV-IgM。
【套件組件】
1.一個(gè)96孔板預(yù)涂
2.陽性對(duì)照:0.5ml
3.陰性對(duì)照:0.5ml
4.洗滌緩沖液(30×):20 ml。稀釋:1:30
5.樣品稀釋緩沖液:6ml
6.6HRP酶聯(lián)試劑(RTU):6ml
7.終止液:6ml
8.TMB底物:6ml
9.TMB底物B:6ml
10.板密封:2
11.密封袋:1
【需要材料但不提供】
1.37℃培養(yǎng)箱
2.酶標(biāo)儀(波長(zhǎng):450nm)
3.精確的移液器和一次性移液器吸頭
4.自動(dòng)洗板機(jī)
5.ELISA振蕩器
1.5ml管
7.板蓋
8.吸收濾紙
9.100ml和1L體積量筒。
【操作程序】
A.制備樣品和試劑
1. 樣品
收集并立即分析測(cè)試樣品(2小時(shí)內(nèi))后立即分離。或等分并長(zhǎng)期儲(chǔ)存在-20°C。避免多個(gè)凍融循環(huán)。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:以約2000-3000×rpm離心20分鐘,以去除沉淀,立即分析或分裝,并儲(chǔ)存于-20℃。
血清:在室溫下凝結(jié)血清(約4小時(shí))。以約2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析血清或等分,并儲(chǔ)存在-20°C。
血漿:用檸檬酸鹽或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內(nèi)以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分,并存儲(chǔ)在-20°C冷凍。
尿:在無菌容器中收集,以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分,并存儲(chǔ)在-20°C冷凍。
組織:組織勻漿的制備將根據(jù)組織類型而變化。收集和沖洗樣品在2-4℃下用PBS(Ph 7.4)。稱重樣品并用PBS(Ph 7.4)勻化,并對(duì)細(xì)胞懸浮液進(jìn)行超聲處理。以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即測(cè)定或等分并儲(chǔ)存在-80℃。
(注意:1.*凝結(jié)血液樣品,離心,避免溶血和沈淀。 2.NaN3不能用作試驗(yàn)樣品防腐劑,因?yàn)樗种艸RP。)
2.洗滌緩沖液
用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液30倍(1/30)(即將20ml濃縮洗滌緩沖液加入580ml蒸餾水中)。
B.測(cè)定程序
在使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫。建議繪制每個(gè)測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.在預(yù)涂板上分別設(shè)置陽性/陰性,測(cè)試樣品和對(duì)照(零)孔,并記錄它們的位置。
2.將50μl的陰性和陽性對(duì)照等分到設(shè)定的孔中。
3.向?qū)φ眨悖┛字屑尤?0μl樣品稀釋緩沖液。
4.向測(cè)試樣品孔中加入50μl適當(dāng)稀釋的樣品(樣品稀釋比例:1:5)。在底部加入溶液而不接觸側(cè)壁。搖動(dòng)平板以混合內(nèi)容物。
5.用蓋子密封板,并在37℃孵育30分鐘。
6.取下蓋子并通過在吸收性濾紙或其他吸收材料上敲擊板來丟棄板內(nèi)容物。
7.棄去溶液,用洗滌緩沖液洗滌板5次。不要讓孔在任何時(shí)候*干燥。
手動(dòng)清洗:丟棄溶液,不要接觸側(cè)壁。將吸水濾紙或其他吸收材料上拍出液體。將洗滌緩沖液填滿每個(gè)孔,并在ELISA振蕩器上輕輕渦流2 分鐘。丟棄內(nèi)容物,并將吸收性濾紙或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自動(dòng)洗滌:棄去所有孔中的溶液,并用洗滌緩沖液洗滌板5次(用緩沖液過量填滿孔)。在zui后的洗滌之后,翻轉(zhuǎn)該板并敲擊吸收性濾紙或其它吸收材料。建議將清洗器設(shè)置為1分鐘的浸泡時(shí)間。
8.向每個(gè)孔中加入50μlHRP結(jié)合物的試劑(對(duì)照孔除外)。在每個(gè)孔底部加入溶液,不要接觸側(cè)壁。
9.用蓋子密封板,并在37℃孵育30分鐘。
10.取下蓋子,用洗滌緩沖液洗板5次。
11.向每個(gè)孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B,蓋上平板并在37℃下孵育15分鐘。避免暴露于光。
12.向每個(gè)孔中加入50μl終止液,充分混勻。顏色應(yīng)立即變?yōu)辄S色。
13.閱讀O.D.在微板讀數(shù)器中在450nm的吸亮度在加入終止溶液的15分鐘內(nèi)。對(duì)于計(jì)算,(相對(duì)O.D.450)=(每個(gè)孔的O.D.450) - (零阱的O.D.450)。標(biāo)準(zhǔn)曲線可以作為每種標(biāo)準(zhǔn)溶液(Y)的相對(duì)O.D.450與標(biāo)準(zhǔn)溶液(X)的相應(yīng)濃度作圖。可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線插入樣品的人類YFV-IgM濃度。
14.注意:如果稀釋樣品,稀釋倍數(shù)乘以內(nèi)插法得到稀釋前的濃度。
C.結(jié)果確定
1.試驗(yàn)有效性:陽性對(duì)照的平均值≥1.00; 陰性對(duì)照的平均值≤0.10。
2.臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=負(fù)控制的平均值+0.15
3.陰性結(jié)果:如果OD值<CUT OFF,樣品為人YFV-IgM陰性。
4.陽性結(jié)果:如果OD值≥CUTOFF,樣品為人類YFV-IgM陽性。
D.注意事項(xiàng)
1.在實(shí)驗(yàn)之前,離心每個(gè)試劑盒組分?jǐn)?shù)分鐘,將所有試劑倒入試管底部。
2.在混合或重新組裝部件時(shí)避免起泡或氣泡。
3.洗滌緩沖液可結(jié)晶并分離。如果發(fā)生這種情況,請(qǐng)加熱管以溶解。
4.建議每個(gè)對(duì)照和樣品一式兩份或重復(fù)測(cè)量三次。
5.不要讓板在任何時(shí)候*干燥!這可以使板上的生物材料失活。
6.不要重復(fù)使用移液器吸頭和管,以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中過期的組件或組件。
8.將TMB底物B儲(chǔ)存在黑暗中,并且為了避免板溫育對(duì)于溫度差的邊緣效應(yīng),建議在使用前在室溫下使TMB底物平衡30分鐘。用滅菌的吸頭抽吸所需的劑量,不要將殘留溶液倒回到小瓶中。
美國(guó)NovaBios
黃熱病和登革熱都通過伊蚊傳播的黃熱病科黃病毒屬病毒感染的急性傳染病,傳染源都是患者和黃熱病,均在熱帶地區(qū)流行。都會(huì)出現(xiàn)病毒血癥及臟器功能受損表現(xiàn)、有出血傾向,同樣以防蚊及支持治療為主,禁用阿司匹林。但二者的病原體不同、臨床表現(xiàn)有所差異的兩種疾病。
(1)黃熱病由黑熱病病毒所致的急性傳染病,該病在中、南美洲和非洲熱帶地區(qū)呈地方性流行,以3~4月較多。特征為突然起病,發(fā)熱,相對(duì)性緩脈和頭痛。潛伏期為3~6天,zui長(zhǎng)13天。根據(jù)病情輕重,可分為極輕型、輕型、重型和惡性型。極輕型和輕型僅靠臨床難以作出診斷,因其發(fā)熱、頭痛、肌痛僅持續(xù)1~2天自愈,這兩型病例數(shù)多,是重要的傳染源。重型和惡性型黃熱病,臨床上可分為三期,全病程10天左右。
①感染期:突發(fā)高熱,可達(dá)40℃以上,可伴畏寒或寒戰(zhàn)、劇烈頭痛、背痛、腿痛和全身衰竭、眼部充血、鼻出血、黃熱病嘔吐,舌尖及舌緣鮮紅,中央有苔,相對(duì)緩脈,上腹不適,壓痛明顯。隨病情逐漸加重,患者煩躁不安,第3天出現(xiàn)黃疸,第4天出現(xiàn)蛋白尿。血白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞比例下降。本期持續(xù)3—4天;
②中毒期:病程第4天左右,癥狀可出現(xiàn)短暫緩解,但數(shù)小時(shí)至24小時(shí)后癥狀再度出現(xiàn)并加重,熱度上升,心率減慢,心音低鈍,血壓降低,黃疸加深,尿蛋白量增多,頻繁嘔吐,上腹痛更明顯。各種出血癥狀相繼出現(xiàn)。如出現(xiàn)頻繁呃逆或嘔吐鮮血,黑便,昏迷,譫妄,無尿等,均為病情轉(zhuǎn)危的先兆,常于第7~9天內(nèi)死亡,偶爾有爆發(fā)型病例在病程第2~3天死亡的。該期一般3~4天,少數(shù)病例可延長(zhǎng)至2周以上;
③恢復(fù)期:從病程第7、8天開始體溫下降,尿蛋白逐漸消黃熱病,黃疸漸退,食欲漸漸恢復(fù)。乏力可持續(xù)l~2周。一般無后遺癥。
實(shí)驗(yàn)室檢查:通常在第3天,90%患者可出現(xiàn)蛋白尿,嚴(yán)重病例可達(dá)到20 g/L。白細(xì)胞計(jì)數(shù)通常降低,到第五天下降到1500—2$00/pl;末期可出現(xiàn)白細(xì)胞增多。血小板減少和凝血時(shí)間,凝血酶原時(shí)間延長(zhǎng)均常見,血清膽紅素輕度升高。血巾分離到病毒,或是抗體滴度升高,或者尸解發(fā)現(xiàn)特征性的中央?yún)^(qū)肝細(xì)胞壞死均可明確診斷。
治療手段:黃熱病尚無*治療方法。一般對(duì)癥治療。加強(qiáng)皮膚及口腔護(hù)理,保持大便通暢,補(bǔ)充維生素B、C、K類,給予流質(zhì)或半流質(zhì)飲食,注意水、電解質(zhì)和酸堿平衡。宜采用物理降溫,可給予少量鎮(zhèn)靜劑,但阿司匹林應(yīng)慎用或禁用。
美國(guó)NovaBios
我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒:登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國(guó)SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
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Yellow fever and dengue fever are transmitted through Aedes mosquito yellow fever virus infection virus infection, the source of infection are patients and yellow fever, are popular in the tropics. There will be viremia and organ function damage performance, bleeding tendency, the same anti-mosquito and support the treatment of the main, disable aspirin. But the two pathogens are different, the clinical manifestations of the difference between the two diseases.
(1) yellow fever caused by the acute fever of the virus caused by the virus, the disease in the South America and Africa tropical region was endemic to 3 to 4 months more. Characterized by sudden onset, fever, relativistic slow pulse and headache. The incubation period is 3 to 6 days and up to 13 days. According to the severity of the disease, can be divided into very light, light, heavy and malignant type. Very light and light clinical difficult to make a diagnosis alone, because of fever, headache, myalgia only 1 to 2 days self-healing, the number of these two cases, is an important source of infection. Severe and malignant yellow fever, clinically can be divided into three, the whole course of about 10 days.
① infection: sudden high fever, up to 40 ℃ or more, can be accompanied by chills or chills, severe headache, back pain, leg pain and systemic failure, eye congestion, epistaxis, yellow fever vomiting, tongue and tongue bright red , The central moss, relative slow pulse, upper abdominal discomfort, tenderness obvious. With the disease gradually increased, patients with irritability, the first three days of jaundice, the first 4 days of proteinuria. The total number of white blood cells and the proportion of neutrophils decreased. This period lasts for 3-4 days;
② poisoning period: the course of the first 4 days or so, the symptoms can be short-term relief, but a few hours to 24 hours after the symptoms re-emergence and increased, heat up, heart rate, heart sounds low blunt, lower blood pressure, jaundice, urine protein increased , Frequent vomiting, upper abdominal pain is more obvious. A variety of bleeding symptoms have emerged. Such as frequent hiccups or vomiting blood, melena, coma, delirium, anuria, etc., are a precursor to the disease, often in the first 7 to 9 days of death, and occasionally explosive cases in the course of the first 2 to 3 days of death The The period is generally 3 to 4 days, a few cases can be extended to more than 2 weeks;
③ recovery period: from the beginning of the first 7,8 days of body temperature decline, urinary protein gradually yellow fever, jaundice gradually returned, appetite gradually restored. Fatigue can be sustained l ~ 2 weeks. Generally no sequelae.
Laboratory tests: usually in the first 3 days, 90% of patients may appear proteinuria, severe cases can reach 20 g / L. White blood cell count is usually reduced to the fifth day down to 1500-2 $ 00 / pl; late there may be leukocytosis. Thrombocytopenia and clotting time, prothrombin time are common, serum bilirubin slightly elevated. Blood towel isolated virus, or antibody titer increased, or autopsy found in the central area of ??the liver cell necrosis can be clearly diagnosed.
Treatment: yellow fever no special treatment. General symptomatic treatment. Strengthen the skin and oral care, keep the stool smooth, add vitamin B, C, K class, given the liquid or semi-liquid diet, pay attention to water, electrolyte and acid-base balance. Should use a physical cooling, can give a small amount of sedatives, but aspirin should be used with caution or disabled.