一、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規格 | 商品貨號 |
GFP人膽囊上皮細胞永生化+GFP | 1×106 | A01X1185 |
細胞詳述
膽囊，是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構造，有濃縮和儲存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。
膽囊內面以粘膜覆蓋，有發達的皺襞。膽囊收縮排空時，皺襞高大而分支；膽囊充盈時，皺襞減少變矮。粘膜上皮為單層柱狀，內分散分部著少量杯狀細胞。膽囊粘膜細胞具有典型的吸收型細胞的特征，具有較強的吸收和濃縮功能，上皮細胞吸收膽汁中的水和無機鹽，經細胞側面的質膜轉運至上皮細胞間隙內，吸收的水和無機鹽通過基膜進入固有層的血管和淋巴管內。同時，膽囊粘膜亦有分泌功能，分泌粘液。
該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。
細胞特性
1) 細胞來源于人膽囊組織。
2) 細胞鑒定：細胞角蛋白19（CK-19）免疫熒光染色為陽性。
3) 經鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5) 細胞生長方式：上皮樣，多角形細胞，貼壁培養。
二、使用方法：
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；
4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化；
3)經1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內；
4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產品：
SK-MEL-1人皮膚黑色瘤細胞專用培養基 | 人髓系白血病細胞 |
小鼠肝上皮細胞 | RBE人肝膽管癌細胞專用培養基 |
人腸微血管內皮細胞 | RBE人肝膽管癌細胞專用培養基 |
人乳腺轉移性小葉癌細胞 | RD人橫紋肌肉瘤細胞專用培養基 |
人骨骼肌細胞 | RD人橫紋肌肉瘤細胞專用培養基 |
大鼠膠質細胞 | REH人急性非B非T淋巴白血病細胞專用培養基 |
人急性成巨核細胞白血病細胞 | REH人急性非B非T淋巴白血病細胞專用培養基 |
大鼠腦星形膠質細胞 | RL95-2人子宮內膜癌細胞專用培養基 |
人淋巴母細胞瘤細胞 | RL95-2人子宮內膜癌細胞專用培養基 |
人腦膠質細胞瘤細胞 | RPMI8226人多發性骨髓瘤細胞專用培養基 |
新生牛鼻甲細胞 | RPMI8226人多發性骨髓瘤細胞專用培養基 |
小鼠腎集合管細胞 | GFP人膽囊上皮細胞永生化+GFPRKO人結腸腺癌細胞專用培養基 |
人卵巢畸胎瘤細胞 | RKO人結腸腺癌細胞專用培養基 |
大鼠腎系膜細胞 | SCC-25人口腔鱗癌細胞專用培養基 |
上皮樣細胞生長的單層細胞 | SCC-25人口腔鱗癌細胞專用培養基 |
細胞培養注意事項：
公司產品僅用于科研關于原代細胞培養的注意事項。原代細胞培養是一項非常重要的實驗技術，掌握好這些注意事項，能讓你的實驗更順利。
首先，無菌操作是關鍵。一定要保持操作環境的清潔，避免細菌或霉菌污染，否則實驗就會失敗。
其次，選擇適合的培養基和血清也很重要。不同細胞對培養基和血清的需求不同，所以要根據細胞類型來選擇合適的培養基和血清。
另外，也是細胞培養中的成分。要新鮮配制，在貯存過程中也要定期補充。
在細胞培養過程中，靜置培養也是非常重要的。細胞在消化分離后需要一定的時間來適應新環境，所以在這段時間內要避免頻繁取出培養瓶觀察。
此外，消化時間也要控制得當。通常消化至肉眼可見微小組織顆粒即可，過長的消化時間會導致細胞損傷加重，影響細胞培養成活率。
最后，對于一些特殊類型的細胞，可能需要添加一些特殊的生長因子來促進細胞生長和增殖。但需要注意的是，這些生長因子的費用通常較高。
