細(xì)胞名稱 血管平滑肌細(xì)胞;T/GHA-VSMC品牌
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 T/G HA-VSMC細(xì)胞建系于1992年(Tilberg A F,et al)。該細(xì)胞系屬有限細(xì)胞系,可因連續(xù)傳代而衰老死亡。連續(xù)傳代試驗(yàn)顯示,T/G HA-VSMC細(xì)胞經(jīng)歷15-20個(gè)群體倍增時(shí)間就會(huì)衰老死亡,固需控制有限的傳代次數(shù)。
培養(yǎng)條件 F12K 10%FBS;加多種生長因子,詳見參考文獻(xiàn)
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C15
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供血管平滑肌細(xì)胞;T/GHA-VSMC品牌的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人吡哆醛/吡哆醇*6激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-MTLR 胃動(dòng)素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Inhibin beta B 抑制素βB/Inhibin β B抗體 規(guī)格 0.1ml
Beta2-GP1 Ab IgA(Human Beta2-Glycoprotein 1 antibody IgA) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗體IgA 96T
AMPK alpha-1 英文名稱: 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPK α 1抗體 0.1ml
C19orf48 英文名稱: 19號染色體開放閱讀框48抗體 0.1ml
Anti-MTLR 胃動(dòng)素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
GFP (Green Fluorecent protein) 綠色熒光蛋白多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
GOLM1 GOLM1 / GP73 鼠單抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh Phospho-Dab1 (Ser491) 磷酸化Disabled 1抗體 規(guī)格 0.1ml
預(yù)染蛋白Marker分子量標(biāo)準(zhǔn)(10-250kDa) 10次 MBI分裝
ZNF230 英文名稱: 鋅指蛋白230抗體 0.2ml
DACH1 英文名稱: 細(xì)胞命運(yùn)決定因子DACH1抗體 0.2ml
GOLM1 GOLM1 / GP73 鼠單抗 (FITC) Human
人腦血管平滑肌細(xì)胞英文名稱:HBVSMC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦血管外膜成纖維細(xì)胞英文名稱:HBVSMC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦血管周細(xì)胞英文名稱:HBVP*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:HCPEC*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞英文名稱:HCPEpiC *規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞英文名稱:HCPF*規(guī)格:5 x 10^5 cells/vial
人腦膜細(xì)胞英文名稱:HMC*規(guī)格:5 x 10^53 cells/vial
規(guī)格:96T/48T大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Thyroglobulin,TG ELISA Kit*
規(guī)格:96T/48T大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒英文名稱:Rat thyroxine,T4 ELISA Kit*
規(guī)格:96T/48T大鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Thyroxine antibody,TAb ELISA Kit*
規(guī)格:96T/48T大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)ELISA試劑盒英文名稱:Rat basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit *
規(guī)格:96T/48T大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒英文名稱:Rat basic fibroblast growth factor 4,bFGF-4 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
規(guī)格:96T/48T大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒英文名稱:Rat basic fibroblast growth factor 6,bFGF-6 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
n-DNA-Ab(Human natural deoxyribonucleic acid antibody) ELISA Kit 人抗天然脫氧核糖核酸抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IL-33 白介素33抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRP5 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體 規(guī)格 0.1ml
17-OHCS(Human 17-Hydroxycorticosteroids) ELISA Kit 人17羥皮質(zhì)類固醇 96T
phospho-c-Raf(Thr269) 英文名稱: 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 0.1ml
C13orf38 英文名稱: 13號染色體開放閱讀框38抗體 0.2ml
Anti-IL-33 白介素33抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml