細(xì)胞名稱 昆蟲卵巢細(xì)胞;SF9品牌
形態(tài)特性 圓形
生長特性 貼壁/懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞系源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織,可以用于復(fù)制桿狀病毒表達(dá)載體。
培養(yǎng)條件 Grace's Insect Medium (GIM w/o BSA, FCS, Whole Egg Ultrafiltrate) 10%FBS
傳代方法 1:
5或更多傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 P36
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供昆蟲卵巢細(xì)胞;SF9品牌的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Anti-CYP21/FITC 熒光素標(biāo)記21-羥化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-LOX-1/OLR1/FITC 熒光素標(biāo)記凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CARKD 碳水化合物激酶結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)抗體 規(guī)格 0.2ml
E2F2 轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗原 0.5mg
HELZ 英文名稱: 人抑制蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SHP-1 造血細(xì)胞磷酸酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-LOX-1/OLR1/FITC 熒光素標(biāo)記凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2) 周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-alpha Adaptin 銜接蛋白α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-BAD(Ser99) 磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 規(guī)格 0.1ml
山羊抗大鼠 IgG(H+L)/TRITC 0.1ml 紅色熒光,Jackson公司分裝
phospho-VAV1 (Tyr160) 英文名稱: 磷酸化鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 0.1ml
DKK1 英文名稱: 抑癌蛋白DKK1抗體 0.1ml
Anti-alpha Adaptin 銜接蛋白α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-MCP-3/CCL7/FITC 熒光素標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體(大、小鼠)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TIMP-3/FITC 熒光素標(biāo)記金屬蛋白酶組織抑制因子-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Acrosin 頂體前體蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗IgG 0.1ml
GEMC1 英文名稱: 染色體卷曲螺旋域包含蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-TIMP-3/FITC 熒光素標(biāo)記金屬蛋白酶組織抑制因子-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Oct-4 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD46/MCP 膜輔蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh p53 (FL-393) 抑制基因p53抗體 規(guī)格 0.2ml
ENG Kit Mouse 小鼠 Endoglin / CD105 / ENG ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TMEM147 英文名稱: 跨膜蛋白147抗體 0.2ml
Cyclin J 英文名稱: 周期素J抗體 0.2ml
Anti-CD46/MCP 膜輔蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml