產品名稱:AMPPD發光顯色試劑盒
供應商:上海古朵
規格:50T
分類 :免疫印跡
儲存條件:—20℃,避光,12個月
用途: 免疫印跡中,發光底物顯色的方法之一。AMPPD又稱二氧雜環乙烷。
備注: 主要由二氧雜環乙烷、磷酸鹽緩沖液組成。
產品庫存: 現貨
有效期:12個月有效。
供應功能:現貨,作為實驗用品,供研究用,不能直接用于人體。
產品簡介:AMPPD是堿性磷酸酶的化學發光底物,在適宜的緩沖液中,隨著酶的催化水解作用,AMPPD分解成AMP-D,后者發出強度很高的光信號,其發光的速度取決于堿磷酶的濃度。當堿磷酶偶合到雜交的探針時,便可以通過此系統檢測到雜交分子的存在量。乙醇胺可使光信號輸出更理想。AMPPD為1,2-二氧環已烷衍生物,它是一種生物化學領域中的超靈敏的堿性磷酸酶底物,其特點:反應速度快,在很短時間內提供正確可靠的結果。在它的分子結構中有兩個重要部分,一個是聯接苯環和金剛烷的二氧四節環,它可以斷裂并發射光子;另一個是磷酸根基團,它維持著整個分子結構的穩定。在通常情況下,這種化合物很穩定。但是,結果有堿性磷酸酶存在,Dioxetane Phosphate作為酶的底物會在酶的催化一脫去磷酸根基團,形成一個不穩定的中間體。這個中間體隨即自行分解(二氧四節環斷裂),同時發射光子。Leagene AMPPD發光顯色試劑盒適用于PVDF膜,不推薦用于硝酸纖維素膜。
產品特點:
1、采用全進口原料:高效、靈敏、特異,嚴格引進技術標準進行批量生產。
2、先進的優化方案:重復性高,可靠性強,效果穩定。
3、購買本公司的產品,提供免費代測技術服務的,有技術疑問可以提供一對一的解答,存在質量問題可申請退換。
4、技術服務:專業,及時,耐心。
操作步驟(僅供參考):
1、臨用前,取適量的A1和A2,等量混合后獲得Dioxetane Buffer。
2、按2.5mgAMPPD溶于25ml Dioxetane Buffer, 配制0.1mg/ml AMPPD底物溶液即為AMPPD Dioxetane Buffer(發色發光顯跡液),用于膜的染色。
3、取適量Dioxetane Buffer洗膜兩次,每次15min。
4、對于PVDF膜進行的堿性磷酸酶反應, 膜置于新鮮配制的AMPPD Dioxetane Buffer 作用5min。
5、將膜移入適量的AMPPD Dioxetane Buffer中,浸泡5min(AP反應)。
6、取出PVDF膜,滴干水分,將膜正面朝下放在一張透明的塑料保鮮膜上,向后折疊將膜包裹起來,成為不漏水的封閉體。
7、在暗房中,將膜正面朝下放在感光膠片上,曝光數秒至數小時。
8、如需要,在室溫下以適量的TBS洗膜15min。
9、將膜放入AMPPD Dioxetane Buffer,條帶應在10~30min內出現。
10、用蒸餾水洗膜,終止反應。晾干后拍照留*的記錄。
注意事項:
1、PVDF膜置于膠片上后,不要改變位置。
2、曝光時間應根據實驗情況,自行摸索。
3、配制好的AMPPD Dioxetane Buffer,應避光低溫保存。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。