人甲胎蛋白異質體-L1(AFP-L1)elisa試劑盒說明書試劑配制
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、*標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、*標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人甲胎蛋白異質體-L1(AFP-L1)elisa試劑盒說明書 Human AFP-L1 ELISA Kit
人甲胎蛋白異質體-L1(AFP-L1)elisa試劑盒說明書 【實驗用途】甲胎蛋白異質體(Variants of AFP or molecular heterogenetic of AFP )是一種單鏈糖蛋白,含糖量約為4%左右。AFP異質體的命名方法為:從陰極開始在LCA親和電泳上AFP的條帶依次為L1、L2、L3。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經*(biotin)標記。樣品和*標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
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人甲胎蛋白異質體-L1(AFP-L1)elisa試劑盒說明書液體類標本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/ 分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5)組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
人甲胎蛋白異質體-L1(AFP-L1)elisa試劑盒說明書的操作要點:
1)標本的采取和保存:可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本;
2)試劑的準備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產物。比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。儀器準備為酶標儀。
7)結果判斷:分定性判定和定量判定。
小鼠胱天蛋白酶7(Casp-7)ELISA試劑盒 ,英文名: Casp-7 ELISA Kit
大鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)ELISA檢測試劑盒RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 96T/48T
人變(MN)免疫試劑盒 Human metanephrine,MN ELISA Kit
RatVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit大鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
NIATION蛋白質濃度定量試劑盒100次
PorcineImmunoglobulinE,IgEELISA試劑盒豬免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人肽基脯酰順反異構酶(PPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬L-乳酸脫氫酶(L-LDH)免疫試劑盒 Pig L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISA Kit
禽白血病病毒(ALV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
Humanpaxillin,PaxELISA試劑盒人樁蛋白(Pax)ELISA試劑盒規格:96T/48T
ELISAKitA豬抗*受體規格:48T/96T
HumandysophinELISAKit人肌養蛋白(dysophin)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat neuophil gelatinase associated lipocalin (NGAL) ELISA Kit 大鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒
HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit 人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒*A(IgA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織基質金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量檢測試劑盒20次
Humanleukoregulin,LRELISAKit人白細胞調節素(LR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
牛陀螺狀細胞;BT
MSR1 Others Rat 大鼠 MSR1 / SCARA1 人細胞裂解液 (陽性對照)
腎實質細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
3T6swiss細胞,小鼠胚胎成纖維細胞 人癌細胞,M453細胞 *過氧化物酶分析試劑盒GPX
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1
IL13RA2 Others Human 人 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照)
牛陀螺狀細胞;BT
MSR1 Others Rat 大鼠 MSR1 / SCARA1 人細胞裂解液 (陽性對照)
腎實質細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
3T6swiss細胞,小鼠胚胎成纖維細胞 人癌細胞,M453細胞 *過氧化物酶分析試劑盒GPX
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1
IL13RA2 Others Human 人 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照)
人甲胎蛋白異質體-L1(AFP-L1)elisa試劑盒說明書FAS Others Cynomolgus 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人細胞裂解液 (陽性對照)
非洲綠猴腎細胞;VERO
CL-0245Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質細胞)5×106cells/瓶×2
Bowes Melanoma細胞,黑色素瘤細胞 人原髓細胞白血病細胞,AL7P/HL-60R細胞 人結直腸腺癌細胞;HT-29
A172(人腦膠質瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 1-77) 人細胞裂解液 (陽性對照)