OverExpress C43(DE3) 感受態細胞100ul*10規格操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富,可提高轉化效率)。
4. 37℃,225 rpm復蘇60分鐘或30℃,225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時,30℃培養可降低錯誤重組的概率,若轉化control pUC19計算轉化效率,則需37℃,225 rpm復蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養箱過夜培養。?
OverExpress C43(DE3) 感受態細胞100ul*10規格注意事項:
1. 感受態細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少終用于涂板的菌量。
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小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1
兔源細胞
ACOX1 Others Human 人 ACOX1 / aox 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
AsPC-1細胞,轉移胰腺腺癌細胞 CoC1細胞耐藥亞株,CoC1/DDP細胞 人非小細胞肺癌細胞;NCI-H23
人神經束膜細胞RNAHPC miRNA5 μg
TNFRSF1B Others Human 人 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腎小球內皮細胞cDNAHRGEC cDNA
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1
QGY-7701細胞,人肝癌細胞 人羊膜細胞,HA細胞 大鼠癌細胞;SHZ-88
KG-1(人急性骨髓性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝細胞基礎培養基,無酚紅 500ml
小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1
兔源細胞
ACOX1 Others Human 人 ACOX1 / aox 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
AsPC-1細胞,轉移胰腺腺癌細胞 CoC1細胞耐藥亞株,CoC1/DDP細胞 人非小細胞肺癌細胞;NCI-H23
人神經束膜細胞RNAHPC miRNA5 μg
TNFRSF1B Others Human 人 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照)
4-基*,英文名或英文縮寫:4-Amino-PGA,級別:USP級,900u/mg,規格:500毫克
534-16-7碳酸銀Silver te
TTE,20XLIQUIDCONCENTRATETTE濃縮液超純級透明無色液體RTsigma
L-乳酸鉀溶液 Potassium L-lactate solution,60% 85895-78-9 250ML 通用試劑
1,2,3-三溴丙烷 1,2,3-Tribromopropane,97% 1996-11-7 25G 通用試劑
*鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:100克
4740-78-7甘油縮甲醛Glycerol formal
3-Bromo-2-(3-chlorobenzyloxy)-5-metxylpxenylboronic acid 870778-83-9
四氫噻吩 Tetrahydrothiophene 110-01-0 100ML 多肽試劑
米勒-海頓肉湯100克
OverExpress C43(DE3) 感受態細胞100ul*10規格鈹試劑Ⅰshēng huà shì jì容量:RT1克
12045-78-2四硼酸鉀potewwium TETRABORATE TETRAHYDRATE
錫,英文名或英文縮寫:Tin,級別:3N,0.2㎜,規格:5盒
1-溴-4-n-丁基苯 1-Bromo-4-butylbenzene,97% 41492-05-1 5G 通用試劑
甲亞胺鹽-H/水合偶氮次甲基-H一鈉鹽/甲亞胺鹽-H單鈉鹽水合物/Azomethine-H monosodium salt hydrate BR,98% 1/5克 國產/進口
OverExpress C43(DE3) 感受態細胞100ul*10規格細胞的種類:
*種:
是凍存產品,由液氮直接拿出,干冰運輸給客戶。一般不*這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大,一旦細胞狀態不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產品的質量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,*進口來源,*保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。