購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實訂購的ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實驗操作。
ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
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ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書細(xì)胞的種類：
*種：
是凍存產(chǎn)品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不*這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，*進(jìn)口來源，*保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);LA1-GFP
倉鼠卵巢細(xì)胞;Lec1
AARS Others Mouse 小鼠 AARS / alanyl-NA syhetase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
BEL-7405細(xì)胞，肝癌細(xì)胞 膀胱癌細(xì)胞,BI U-87細(xì)胞 615小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤瘤株;DCS
人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHIMEC NA
CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腎上皮細(xì)胞總RNAHREpiC NA
小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(MOPC)(5×105)
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA
小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));DG6-VAP33-GFP 小鼠表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 Mouse
LRPAP1 Others Mouse 小鼠 LRPAP1 / RAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);LA1-GFP
倉鼠卵巢細(xì)胞;Lec1
AARS Others Mouse 小鼠 AARS / alanyl-NA syhetase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
BEL-7405細(xì)胞，肝癌細(xì)胞 膀胱癌細(xì)胞,BI U-87細(xì)胞 615小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤瘤株;DCS
人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHIMEC NA
CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
L-PROLINEL-脯酸美國藥典級2KG
7529-22-8N-甲基-N-氧化嗎啉4-metxylmorpholine N-oxide
Fmoc-Met-OHFMOC-L-蛋酸25克特純，98%
辛基氧基硅烷 Trimethoxy(octyl)silane,≥96.0% 3069-40-7 5ML 多肽試劑
2-丙醇，英文名或英文縮寫：IPA，級別：CP，98.5%，規(guī)格：1克
奈酚綠B100克
13446-19-0結(jié)晶高錄酸(*) PERCHLORATE HEXAHYDRATE
D-MANNOSED-甘露糖高純級25G3458-28-4RT
亞甲基藍(lán) Methylene Blue hydrate,≥97.0% 122965-43-9 25G 通用試劑
二烯基本(間位和隊位混合物)(含穩(wěn)定劑基烯基本,二基本) Divinylbqnzqnq 131-74-0
ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書硼酸25毫克保存：-20℃
CesiumSulfate 5g/25g/100g原裝 Amresco 0473
鎢酸鉀shēng huà shì jì容量：500克
軟骨速二糖Δdi-0S內(nèi)鹽(-20`C) cLPHc-DqLTc-Uc-[1->3]-GcLNcC wo7ium ScLT 13613-69-9
右旋糖 D(+)-Glucosq 20-99-7
ER2566 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書注意事項:
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
