操作流程:
1. 帶柄尼龍篩1個(gè)說明書根據(jù)要保存的各樣本的體積,計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍(100mg組織約用1ml RNAwait);離心收集2×107細(xì)胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原則是:量寧多勿少。建議在實(shí)際操作中不要稱量組織,而直接根據(jù)目測(cè)結(jié)果加入RNAwait量,以加快操作和減少污染。例如5mm邊長(zhǎng)的立方體組織塊,體積為125mm3=125µl,故應(yīng)當(dāng)加入1.25ml的RNAwait液。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中。
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀,較小的組織直接取下,立即*浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入,組織中間部位的RNA不能受到保護(hù)。較大的組織可以切成厚度<0.5 cm的任意片狀后保存,較小的組織(如大鼠的腎臟、脾臟,小鼠的大部分器官)則可以直接浸入RNAwait。
4. 將收集管存放于溫度適當(dāng)?shù)牡胤剑娣艜r(shí)間不能超過該溫度下的長(zhǎng)存放時(shí)間(請(qǐng)看技術(shù)指標(biāo)),如果要存放在-20℃或-80℃,需先將樣品在4℃放置過夜后再轉(zhuǎn)移到后的溫度。注:將樣品轉(zhuǎn)移到-20℃或-80℃前,需要棄掉保護(hù)液。
帶柄尼龍篩1個(gè)說明書實(shí)驗(yàn)要點(diǎn) :
1.CTAB 溶液在低于15℃時(shí)會(huì)析出沉淀,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預(yù)熱。
2.在適條件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過,某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質(zhì),特別是多糖,使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.飽和酚雖然可有效地使蛋白質(zhì)變性,但酚不能*抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可減輕這兩種現(xiàn)象,同時(shí)可加入適量的(*——=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白質(zhì)層緊密,使水相和有機(jī)相分層較好。 細(xì)菌的培養(yǎng)和收集 將含有質(zhì)粒pBS 的DH5α菌種接種在LB 固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24 小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB 液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12 小時(shí)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期。非凍型組織RNA保存液 小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA 十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速,能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA 有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
注意:
1. 帶柄尼龍篩1個(gè)說明書對(duì)大腸桿菌可從固體培養(yǎng)基上挑取單個(gè)菌落直接進(jìn)行煮沸法提取質(zhì)粒DNA。
2. 煮沸法中添加*有一定限度,濃度高時(shí),細(xì)菌裂解效果反而不好。有時(shí)不同*也能溶菌。
3. 提取的質(zhì)粒DNA 中會(huì)含有RNA,但RNA 并不干擾進(jìn)一步實(shí)驗(yàn),如限制性內(nèi)切酶消化,亞克隆及連接反應(yīng)等。
以下是帶柄尼龍篩1個(gè)說明書的相關(guān)產(chǎn)品:
N,N-雙(2-羥乙基)* 150-25-4
N,N-Bis(2-hydroxyethyl)glycine分子式:C6H13NO4分子量:163.17
N,N-二(2-羥乙基)氨基,N,N-二羥乙基*
N,N-雙(2-羥乙基)* 150-25-4
N,N-Bis(2-hydroxyethyl)glycine分子式:C6H13NO4分子量:163.17
N,N-二(2-羥乙基)氨基,N,N-二羥乙基*
N,N-雙(2-羥乙基)* 150-25-4
N,N-Bis(2-hydroxyethyl)glycine分子式:C6H13NO4分子量:163.17
N,N-二(2-羥乙基)氨基,N,N-二羥乙基*
N,N-雙(2-羥乙基)* 150-25-4
N,N-Bis(2-hydroxyethyl)glycine分子式:C6H13NO4分子量:163.17
2 ugpGEX-20TpGEX-20T低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ugpGEX-2TpGEX-2T低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ugpGEX-2TKpGEX-2TK低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ugpGEX-2TK2-LinkerpGEX-2TK2-Linker低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ugpGEX-3XpGEX-3X低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ugpGEX-4TpGEX-4T低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ugpGEX-4T- 1pGEX-4T- 1低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ugpGEX-4T-1pGEX-4T-1低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ugpACYCDuet-1pACYCDuet-1低溫運(yùn)輸,-20℃保存
帶柄尼龍篩1個(gè)說明書進(jìn)口細(xì)胞色素P450 24A1抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
進(jìn)口細(xì)胞色素P450 1A2抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
進(jìn)口細(xì)胞色素P450 1A1抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
進(jìn)口細(xì)胞色素P450 19抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
進(jìn)口細(xì)胞色素P450 17抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
進(jìn)口細(xì)胞色素P450 11B1抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
* TGFA1 Polyclonal Antibody 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體關(guān)聯(lián)蛋白1 多克隆抗體
* TGFβ3 Polyclonal Antibody 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3 多克隆抗體
* TGFβ2 Polyclonal Antibody 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 多克隆抗體
* TGF β1 Polyclonal Antibody 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 多克隆抗體
* TGFβ1 Mouse Monoclonal Antibody(5D2) 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 小鼠單克隆抗體(5D2)
* TGFβ1 Mouse Monoclonal Antibody(10E5) 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 小鼠單克隆抗體(10E5)
* BGH3 Polyclonal Antibody 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子,β引導(dǎo) 多克隆抗體