填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次說明書實(shí)驗(yàn)要點(diǎn) :
1.CTAB 溶液在低于15℃時(shí)會(huì)析出沉淀,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預(yù)熱。
2.在適條件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過,某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質(zhì),特別是多糖,使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.飽和酚雖然可有效地使蛋白質(zhì)變性,但酚不能*抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液,可減輕這兩種現(xiàn)象,同時(shí)可加入適量的(*——=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白質(zhì)層緊密,使水相和有機(jī)相分層較好。 細(xì)菌的培養(yǎng)和收集 將含有質(zhì)粒pBS 的DH5α菌種接種在LB 固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24 小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB 液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12 小時(shí)至對(duì)數(shù)生長后期。非凍型組織RNA保存液 小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA 十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡便、快速,能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA 有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次說明書的產(chǎn)品圖片:
操作流程:
1. 填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次說明書根據(jù)要保存的各樣本的體積,計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍(100mg組織約用1ml RNAwait);離心收集2×107細(xì)胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原則是:量寧多勿少。建議在實(shí)際操作中不要稱量組織,而直接根據(jù)目測結(jié)果加入RNAwait量,以加快操作和減少污染。例如5mm邊長的立方體組織塊,體積為125mm3=125µl,故應(yīng)當(dāng)加入1.25ml的RNAwait液。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中。
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀,較小的組織直接取下,立即*浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入,組織中間部位的RNA不能受到保護(hù)。較大的組織可以切成厚度<0.5 cm的任意片狀后保存,較小的組織(如大鼠的腎臟、脾臟,小鼠的大部分器官)則可以直接浸入RNAwait。
4. 將收集管存放于溫度適當(dāng)?shù)牡胤剑娣艜r(shí)間不能超過該溫度下的長存放時(shí)間(請(qǐng)看技術(shù)指標(biāo)),如果要存放在-20℃或-80℃,需先將樣品在4℃放置過夜后再轉(zhuǎn)移到后的溫度。注:將樣品轉(zhuǎn)移到-20℃或-80℃前,需要棄掉保護(hù)液。
以下是填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次說明書的相關(guān)產(chǎn)品:
(3S,3’S)-3,3’-二羥基-β,β-胡蘿卜素-4,4’-二酮 3,3'-二羥基-beta,beta-胡蘿卜素-4,4'-二酮 3,3'-二羥基-4,4'-二酮基-Β,Β'-胡蘿卜素醇備注:SB01
蝦青素 472-61-7
Astaxanthin分子式:C40H52O4分子量:596.84
(3S,3’S)-3,3’-二羥基-β,β-胡蘿卜素-4,4’-二酮 3,3'-二羥基-beta,beta-胡蘿卜素-4,4'-二酮 3,3'-二羥基-4,4'-二酮基-Β,Β'-胡蘿卜素醇備注:SB01 CH
洛伐司他汀 75330-75-5
Lovastatin分子式:C24H36O5分子量:404.54
(S)-2-甲基-(1S,3S,7S,8S,8aR) 1,2,3,7,8,8a-六氫-3,7-二甲基-8-{2-(2R,4R)-4-羥基-6-氧代-2-四氫吡喃基-乙基}-1-酯 *
洛伐司他汀 75330-75-5
Lovastatin分子式:C24H36O5分子量:404.54
(S)-2-甲基-(1S,3S,7S,8S,8aR) 1,2,3,7,8,8a-六氫-3,7-二甲基-8-{2-(2R,4R)-4-羥基-6-氧代-2-四氫吡喃基-乙基}-1-酯 *備注:A288
洛伐司他汀 75330-75-5
原人參三醇備注:
20(R)-*
20(R)-Ginsenoside Rg3分子式:C42H72O13分子量:
20(R)*備注:
牡荊素 3681-93-4
Vitexin分子式:C21H20O10分子量:432.38
牡荊葡基黃酮 牡荊苷 芹菜甙元(芹菜素)-8-O-葡萄糖甙 牧荊葡基黃酮備注:
牡荊素-2-O-鼠李糖苷 64820-99-1
Vitexin-2-O-rhamnoside分子式:C27H30O14分子量:578.52
牧荊葡基黃酮-2''-O-鼠李糖苷 牡荊素-2-O-鼠李糖苷 異牡荊素鼠李糖苷備注:
升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷
填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次說明書進(jìn)口再生基因蛋白4抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
進(jìn)口過敏毒素C5a/補(bǔ)體C5a抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
進(jìn)口過敏毒素C4/補(bǔ)體C4抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
進(jìn)口過敏毒素C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
進(jìn)口過敏毒素C3(補(bǔ)體C3)抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
進(jìn)口過氧化酶活化增生受體γ抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
* p63 (phospho Ser455) Polyclonal Antibody p63 (phospho Ser455) 多克隆抗體
* p57 (Acetyl Lys278) Polyclonal Antibody p57 (Acetyl Lys278) 多克隆抗體
* TIGAR Polyclonal Antibody P53誘導(dǎo)的糖酵解和凋亡的調(diào)控子 多克隆抗體
* p53 Antibody,TP53,TRP53,P53,LFS1,Tumor suppressor p53,Phosphoprotein p53 p53抗體
* p53 Antibody,TP53,TRP53,P53,LFS1,Tumor suppressor p53,Phosphoprotein p53 p53抗體
* p53R2 Polyclonal Antibody p53R2多克隆抗體
* p53NIDP1 Antibody,TP53INP1,Teap,TP53INP1A,p53DINP1,P53DINP1,TP53DINP1,SIP,F(xiàn)LJ22139,DKFZp434M1317,TP53INP1B p53NIDP1抗體
注意:
1. 填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次說明書對(duì)大腸桿菌可從固體培養(yǎng)基上挑取單個(gè)菌落直接進(jìn)行煮沸法提取質(zhì)粒DNA。
2. 煮沸法中添加*有一定限度,濃度高時(shí),細(xì)菌裂解效果反而不好。有時(shí)不同*也能溶菌。
3. 提取的質(zhì)粒DNA 中會(huì)含有RNA,但RNA 并不干擾進(jìn)一步實(shí)驗(yàn),如限制性內(nèi)切酶消化,亞克隆及連接反應(yīng)等。