UDPG焦磷酸化酶(UPG)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (UDPG焦磷酸化酶(UPG)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾)。
4 ). UDPG焦磷酸化酶(UPG)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
產(chǎn)品名稱:?UDPG焦磷酸化酶(UPG)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)
規(guī)格:100管/96樣
測(cè)試方法:微量法
測(cè)定意義UDPG焦磷酸化酶是生物體糖原合成過(guò)程中的關(guān)鍵酶。在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化,將1-磷酸葡萄糖與UTP分子合成為UDP-葡萄糖(UDPG)。
UDPG焦磷酸化酶(UPG)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:
1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品的制備 :
細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每100萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測(cè)。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的處理:稱取1mg,將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
UDPG焦磷酸化酶(UPG)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至520nm,蒸餾水調(diào)零。
2、取0.5mL上清液(或稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品)+0.5mL試劑一+0.5mL試劑二于有蓋試管中,置沸水浴中保溫30min(蓋緊,防止水分散失),每10min振蕩一次。
3、待冷卻后,在試管中加入1mL試劑三,振蕩30s,靜置片刻,使色素轉(zhuǎn)至試劑三;吸取0.8mL-1mL上層溶液于1mL玻璃比色皿中,用試劑三調(diào)零,于520nm波長(zhǎng)處比色,記錄吸光值。
4、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品吸光值和濃度,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2-氟-3-羥基吡啶 分類: 化學(xué),固相合成,
2,2'-二烯丙基雙酚A 分類: 化學(xué),固相合成,
5-乙氧基吲哚-3-甲醛 分類: 化學(xué),固相合成,
3-[(N-Boc-N-甲氨基)甲基]哌啶 分類: 化學(xué),固相合成,
2-(N-Cbz)-3-(N-Boc)-2,3-二氨基丙酸 分類: 化學(xué),固相合成,
2--1,3-二甲氧基苯 分類: 化學(xué),固相合成,
氟鋯酸銨 分類: 化學(xué),固相合成,
7-硝基喹唑啉-2,4-二酮 分類: 化學(xué),固相合成,
1-甲基-4-哌啶甲酸甲酯 分類: 化學(xué),固相合成,
1-甲基-2-哌啶甲酸甲酯 分類: 化學(xué),固相合成,
1-甲基-3-哌啶甲酸甲酯 分類: 化學(xué),固相合成,
4-羥基-3--5-硝基芐腈 分類: 化學(xué),固相合成,
2-甲基-3-乙酰氧基苯甲酸 分類: 化學(xué),固相合成,
(3-氟-4-嗎啉-4-基苯基)氨基甲酸芐酯 分類: 化學(xué),固相合成,
2-氯-6-羥基吡啶 分類: 化學(xué),固相合成,
2-甲硫基苯硼酸 分類: 化學(xué),固相合成,
三(2-吡啶基甲基)胺 分類: 化學(xué),固相合成,
鈮酸銨草酸鹽水合物 分類: 化學(xué),固相合成,
3-吡啶甲酸酐 分類: 化學(xué),固相合成,
4-氯-1-茚滿酮 分類: 化學(xué),合成試劑,
3-咔唑 分類: 化學(xué),固相合成,
(+)-S-Myricanol glucoside 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
1-(3,4-Dihydroxyphenyl)- 7-(4-hy 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
1,11b-Dihydro-11b-hydroxymedicar 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
1,2-Diacetoxy-4,7,8- trihydroxy- 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
12-Ursene-3,16,22-triol 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
Wallichinine 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
Torososide A 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
丹參酮IIB 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
Syzalterin 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
Stilbostemin B 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
?UDPG焦磷酸化酶(UPG)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)Schleicheol 1 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
Sanggenol P 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
全草含茜草萜酸 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
葉含乙酰癭花香茶菜素 A 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
Robtein 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
Pedicin 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
UDPG焦磷酸化酶(UPG)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)ELISA實(shí)驗(yàn)UDPG焦磷酸化酶(UPG)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)用規(guī)則
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可*保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。