中文名稱:熱休克蛋白90抑制劑(Ganetespib)
英文名稱:HSP90 Inhibitor
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
產品貨號:BJ-01X7173
英文名稱:HSP90 Inhibitor 產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg Ganetespib是一種*的熱休克蛋白90(HSP90)抑制劑,在OSA8細胞中,其IC50值為4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! :888216-25-9 別名:STA-9090 純度:99.56% 分子量:364.4 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備F-12K培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
Pseudocowpox Virus(PCPV)偽牛痘病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ABCA5 三磷酸苷結合盒轉運蛋白A亞基5抗體 規格: 0.2mlMCP1/CCL2 單核細胞趨化蛋白1抗體 規格: 0.1ml
Porcine Circovirus(PCV)豬圓環病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周IL-12 白介素12抗體 規格: 0.1mlRabbit anti-MG IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗爪沙鼠IgG 規格: 0.1ml
Radix gentianae龍膽LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Mouse Anti-human IgG/FITC FITC標記的小鼠抗人IgG 規格: 0.3mlVASH1 管抑制蛋白1抗體 規格: 0.1ml
Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Virus(HFRSV)腎綜合癥出血熱病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-ATF2(Ser44) 磷酸化活化復制因子2抗體 規格: 0.1mlMKLP1 有絲分裂驅動蛋白樣1抗體 規格: 0.2ml
Caprine Herpesvirus(CpHV)山羊皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周NHLRC2 非霍奇金重復蛋白2抗體 規格: 0.2mlphospho-MEK5(Ser142) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激5抗體 規格: 0.1ml
Rhizoma sparganii三棱LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周ARL11 ADP核糖基化因子樣11抗體 規格: 0.2mlNOS-2/iNOS 氮合成-2抗體(誘導型) 規格: 0.1ml
Mycoplasma galliscepticum雞敗血支原體LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周RPA32/RPA2 復制因子A蛋白2 規格: 0.2mlHistone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白抗體 規格: 0.2ml
Streptococcus Suis Type 2 豬鏈球2型LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-Goat IgM 兔抗羊IgM 規格: 1mgGoat Anti-human IgG/Gold 膠體金標記的羊抗人IgG 規格: 0.5ml
Yellow Fever Virus( vaccine strain,17D)黃熱病病毒疫苗株17D 探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗小鼠IgG 規格: 0.1mlRabbit Anti-Goat IgM/Gold 膠體金標記的兔抗羊IgM 規格: 2ml
Radix sophorae flavescentis苦參染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周CENPH 著絲粒蛋白H抗體 規格: 0.2mlGLP-2 樣肽-2抗體 規格: 0.1ml
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操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)