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產品名稱:植物種子(大型)直接PCR試劑盒-防PCR產物污染體系
英文名稱:Plant Seed Direct PCR Kit II-UNG
產品規格:50 ×20μl rxns 200 ×20μl rxns 500×20μl rxns 2000 ×20μl rxns
系列:植物種子直接PCR系列
產品貨號:TP-0314T
保存說明: Part I 4℃,Part II -20℃
產品描述:直接使用種子裂解液作為模板進行PCR擴增,無需單獨抽提DNA,快速,靈敏度高。增加了UNG防污染體系,杜絕假陽性。
試劑盒應用:
♦ 適用范圍:多種植物種子。
♦ 裂解混合液:僅用作 PCR 模板。
♦ 試劑盒可用于以下用途:轉基因種子鑒定、植物基因分型等。
Plant Seed Direct PCR Kit II-UNG試劑盒 試劑盒內容
Part I (Store at R.T. or 4°C)
♦ Buffer SP1:提供植物種子裂解反應所需的環境。
♦ Buffer SP2:中和裂解產物,使其不影響后續 PCR 反應。
♦ 6× DNA Loading Buffer:該 Loading Buffer 中不含有 SDS。建議在進行瓊脂糖凝膠電泳時,配搭使用試劑盒附贈的6× DNA Loading Buffer,以便取得好的電泳結果。切勿使用含有 SDS 的 Loading Buffer,否則在電泳時會在泳時會在泳道中有一大團拖尾亮光,影響實驗結果。
Part II (Store at -20°C)
♦ 2× Seed PCR EasyTM (UNG):在 2× Seed PCR EasyTM Mix 的基礎上用 dUTP替代了 dTTP,并同時加入能夠降解含有 dUTP 模板的UNG 酶,從而能夠有效防止 PCR 擴增產物污染。
操作流程圖:
產品介紹:
本產品采用*的裂解反應體系,能夠快速的從植物(如:水稻、小麥、煙草、玉米、大豆、油菜、棉花等)的種子樣本中釋放出基因組 DNA,用于 PCR 反應,因此特別適合大規模基因檢測。為了滿足不同檢測試驗的需要,本試劑盒可以使用多種類型的樣本(如完整種子、微量組織切塊或多顆種子的磨碎樣本)進行實驗。其中對于還需要進行萌發的種子樣本,可以選擇切取種胚以外的微量組織切塊(1-5mg)進行實驗;對于需要在大量樣本中進行抽樣檢測的實驗,可以選擇將多個樣本混合并磨碎成直徑0.5mm 左右的顆粒后再進行實驗(低可以檢測出0.1%的目的樣本)。
裂解反應體系釋放基因組 DNA 過程可以在 5-10min 內完成,不需要其他去蛋白、RNA或者次生代謝產物的過程,即可將釋放出的微量 DNA 作為模板進行 PCR 反應。
2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG)在 2× Seed PCR EasyTM Mix 的基礎上用 dUTP 替代了 dTTP,并同時加入能夠降解含有 dUTP 模板的UNG 酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR 反應前,利用 UNG 酶降解含有尿嘧啶的 PCR 產物,UNG 酶對不含有尿嘧啶的模板不會造成任何影響,從而保證擴增的特異性和準確性,防止了大規模基因檢測時可能出現的 PCR 產物污染問題。
D-Taq DNA polymerase 是 Foregene 為直接PCR反應專門研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase 對多種 PCR 反應抑制劑具有*的的耐受性、在各種復雜反應體系中均能高效擴增痕量的 DNA,擴增速度可達 2Kb/min,特別適合進行直接 PCR反應。
注意事項:
♦ 無需進行費時而昂貴的 DNA 純化。
♦ 樣品需求量小,只需取單粒種子即可。
♦ 無需研磨、破碎等特殊處理,操作簡便。
♦ 防污染 PCR 體系 2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG),有效消除由 PCR 產物所引起的污染,保證擴增的特異性和準確性。
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