冷凍保存細胞之方法:
人二倍體細胞;HEL圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
產品描述:
細胞名稱 人二倍體細胞;HEL圖片
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 HEL是一株人二倍體細胞系,具有典型的成纖維細胞
態,染色體2n=46??捎糜谧鞫喾N病毒的宿主,抗衰老藥物試驗等。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C19
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)人二倍體細胞;HEL圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
?1.一般客戶拿到人二倍體細胞;HEL圖片后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發;
(2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
(3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發;
(4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發;
(5)細胞培養時經其它處理的,不重發;
(6)細胞收到2天內,未告知,不重發;
(7)視具體情況而定。
VE-cad *豬血管內皮鈣粘著蛋白復合體 規格48T/96T
ANG-Ⅱ *豬血管緊張素Ⅱ 規格48T/96T
cTn-Ⅰ *豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ 規格48T/96T
PAI-1 *豬纖溶酶原激活物抑制因子1 規格48T/96T
PAI *豬纖溶酶原激活物抑制因子 規格48T/96T
ICAM-3/CD50 *豬細胞間粘附分子3 規格48T/96T
ICAM-2/CD102 *豬細胞間粘附分子2 規格48T/96T
HA *豬透明質酸 規格48T/96T
MBP *豬髓磷脂堿性蛋白 規格48T/96T
MPO *豬髓過氧化物酶 規格48T/96T
人二倍體細胞;HEL圖片ACA11 peptide 擬南芥ACA11蛋白多肽抗原ACA11 peptide 擬南芥ACA11蛋白多肽抗原 0.5mgACA11 peptide 擬南芥ACA11蛋白多肽抗原
ACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管緊張素轉換酶(抗原) 0.5mgACE( ACE, testis-specific isoform precursor
血管緊張素轉換酶2抗原ACE2(Angiotensin converting enzyme 2) 血管緊張素轉換酶2抗原 0.5mgACE2(Angiotensin converting enzyme 2
ACEI (Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitor ) 血管緊張素1轉換酶抑制劑(抗原) 0.5mgACEI (Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitor
peptide 抗腫瘤P53抗原Acetylated-P53(Lys382) peptide 抗腫瘤P53抗原 0.5mlAcetylated-P53(Lys382
Acinus peptide ACINUS 多肽抗原Acinus peptide ACINUS 多肽抗原 0.5mgAcinus peptide ACINUS 多肽抗原
ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質激素(7-23)(抗原) 0.2mgACTH (Adrenorticotrophin hormons
ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質激素(18-39)(抗原) 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons