產品描述:
細胞名稱 人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN培養
形態特性成纖維細胞樣
生長特性貼壁生長
特征特性該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況C6
凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
冷凍保存細胞之方法:
人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN培養冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN培養準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
IL-7*小鼠白介素7規格48T/96T
IL-4*小鼠白介素4規格48T/96T
IL-3*小鼠白介素3規格48T/96T
IL-2R*小鼠白介素2受體規格48T/96T
IL-2sRβ*小鼠白介素2可溶性受體β鏈規格48T/96T
IL-2sRα*小鼠白介素2可溶性受體α鏈規格48T/96T
IL-27*小鼠白介素27規格48T/96T
IL-23*小鼠白介素23規格48T/96T
IL-2*小鼠白介素2規格48T/96T
IL1Ra*小鼠白介素1受體拮抗劑規格48T/96T
人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN培養FGF5peptide纖維母細胞生長因子5抗原FGF5peptide纖維母細胞生長因子5抗原0.5mgFGF5peptide纖維母細胞生長因子5抗原
FGF-7/KGF(Keratinocytegrowthfactorprecursor)成纖維細胞生長因子-7/纖維母細胞生長因子(抗原)0.5mgFGF-7/KGF(Keratinocytegrowthfactorprecursor
FGF-8/HBGF-8(Fibroblastgrowthfactor8)成纖維細胞生長因子-8/纖維母細胞生長因子-8(抗原)0.5mgFGF-8/HBGF-8(Fibroblastgrowthfactor8
FGFR1peptide堿性成纖維細胞生長因子受體-1(多肽抗原)0.5mgFGFR1peptide堿性成纖維細胞生長因子受體-1(多肽抗原
成纖維細胞生長因子受體2抗原FGFR2(FibroblastGrowthFactorReceptor2)成纖維細胞生長因子受體2抗原0.5mgFGFR2(FibroblastGrowthFactorReceptor2
fgL2(Fibrinogen-like2)凝血酶原酶(又稱:纖維介素蛋白;前凝血素)0.5mgfgL2(Fibrinogen-like2
Fibronectin(FN)纖維連結蛋白(多肽抗原)0.5mgFibronectin(FN
Fibulin1衰老關鍵蛋白抗原Fibulin1衰老關鍵蛋白抗原0.5mgFibulin1衰老關鍵蛋白抗原
注意事項:
?1.一般客戶拿到人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN培養后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發;
(2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
(3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發;
(4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發;
(5)細胞培養時經其它處理的,不重發;
(6)細胞收到2天內,未告知,不重發;
(7)視具體情況而定。