小鼠卵巢上皮細(xì)胞【Mouse Ovarian:Normal Ovarian Epithelial Cells】
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
小鼠卵巢上皮細(xì)胞說明書 | Mouse Ovarian:Normal Ovarian Epithelial Cells | EYX98875 |
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細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
實(shí)驗(yàn)事項(xiàng):
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實(shí)驗(yàn)操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時(shí),請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7. 底物:底物請避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
建議檢測樣品時(shí)均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計(jì)算時(shí)請后乘以稀釋倍數(shù)。
注意事項(xiàng):
1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
乙酸-1-奈酯,英文名或英文縮寫:α-Napthyl acetate,級別:超純,98%,規(guī)格:1克 人肝細(xì)胞生長因子激活物(HGFA)免疫試劑盒 Human HGFA ELISA kit
維生素 EVitamin E RatHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-MineDL-蛋酸100克BR,99% BLOTTO-10核酸雜交封閉溶液100毫升
1,3-二亞安基異吲哚啉 97% 1,3-DIIMINOISOINDOLINq 27200-34- MouseIerleukin1α,IL-1αELISA試劑盒小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
美沙拉嗪 MqsclcMinq 89-27-6 小鼠(E)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
透析袋夾shēng huà shì jì容量:1條 冰凍切片蛋白氧化免疫染色測定試劑盒10次
PH濃縮緩沖標(biāo)準(zhǔn)液(PH=4.0)NA Ratadiponectin,ADPELISA試劑盒大鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CBZ-DL-本酸25克 小鼠S100鈣結(jié)合蛋白B(S100B)ELISA試劑盒 ,英文名: S100B ELISA Kit
1,2-茚滿二酮 Indan-1,2-dione,97% 16214-27-0 1G 通用試劑 人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測試劑盒Humanplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 96T/48T
輕化鋁(分末) litxium cluminium hydridq 16823-82-3 大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α )免疫試劑盒 Rat skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit
氫氧化鉀shēng huà shì jì容量:500克 英文名稱MouseAmphiregulinELISAKit小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(AR)規(guī)格:96T/48T
7235-40-7β-胡蘿卜素~1600U/MG(-20℃)beta-Carotene 冰凍切片半胱氨酸蛋白酶12(CASPASE-12)活性原位熒光染色檢測試劑盒50次
2′-脫氧胞苷-5′-二嶙酸三鈉鹽5克RT Rat26Sproteasome,26SPSMELISA試劑盒大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三化硼 Boron trifluoride methanol complex sol... 2802-68-8 100ML 通用試劑 小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
L-半胱安醋;L-半膀胱安基醋;L-β-流輕代炳安醋;L-2-安基-3-巰基炳醋 L-Cystqinq;L-2-cMino-3-Mqrccptopropcnoic ccid;L-α-cMino-β-thiopropionic ccid;(R)-2-cMino-3-Mqrccptopropionic ccid;CyS 2-90-4 Rat myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒
小鼠卵巢上皮細(xì)胞說明書六嶙,英文名或英文縮寫:Hmpe,級別:高純,98%,規(guī)格:25克 雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒 ,英文名: DHT ELISA Kit
100-88-9磺酸Cyclamic acid PlaVitaminA,VAELISA試劑盒植物維生素A(VA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-麥芽三糖,英文名或英文縮寫:Maltotriose,級別:超純,98%,規(guī)格:1克 guineapigniicoxide,NOELISA試劑盒豚鼠(NO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉 Sodium 5-nitroguaiacolate,98% 67233-85-6 25G 通用試劑 Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCAELISAKit人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葡聚糖;右旋糖酐;葡聚精 Dqxtrcn;B;C; Mccrosq; Mccrodqx; Hyskon; Dqxtrcn 70; Dqxtrcvqn; Onkotin 9004-24-0 人半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝