名 稱:PIIINP ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫檢測法)
規(guī) 格:96T/48T
說明書:48孔配置一份/96孔配置一份
用 途:僅供使用
服 務(wù):多年代測服務(wù),質(zhì)量保證
品 牌:酶聯(lián)生物
操作步驟:
1.取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。
2.分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個(gè)濃度)、空白孔、待測樣品組。
注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3.加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中加入50ul的待測樣本。
4.加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入100ul的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5.溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時(shí)。
6.洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙*拍干。
7.顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。
8.終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液。
9.讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。
實(shí)驗(yàn)規(guī)則:
1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%,可用水和電子天平進(jìn)行確定,但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支,吸取不同的液體后,要更換槍頭,即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
8、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體,也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
9、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
10、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*,沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
11、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液,加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
12、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
13、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
15、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。
16、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
17、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。
PIIINP ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫檢測法)由上海酶聯(lián)生物提供,包括PIIINP ELISA試劑盒說明書,酶聯(lián)免疫檢測試劑盒免
費(fèi)代測等產(chǎn)品詳細(xì)介紹。