冷凍保存細胞之方法:
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?;CHO-HCV-C冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
產品描述:
細胞名稱 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?;CHO-HCV-C
形態特性上皮細胞樣
生長特性貼壁生長
特征特性CHO-HCV-C細胞整合有丙型肝炎病毒的Core基因,能穩定表達C蛋白,是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。
培養條件DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS
傳代方法1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況C15
凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR
同工酶同工酶鑒定
染色體
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。籆HO-HCV-C準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
?1.一般客戶拿到中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?;CHO-HCV-C后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發;
(2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
(3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發;
(4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發;
(5)細胞培養時經其它處理的,不重發;
(6)細胞收到2天內,未告知,不重發;
(7)視具體情況而定。
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1036
人淋巴成纖維細胞 (HLF)( 5×105 )
CL-0423RIN-m5f(大鼠胰島β細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人胰腺腺泡上皮癌;HPAC 大鼠冠狀動脈平滑肌細胞*培養基 100mL
B16 小鼠黑色素瘤細胞
SEMA4D Others Human 人 SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照)
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-C血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胰島細胞抗體(ICA)免疫試劑盒 Human islet cell aibody,ICA ELISA Kit
人抗線粒體抗體(AMA)ELISA試劑盒 ,英文名: AMA ELISA Kit
Ratghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISA試劑盒大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanEpithelialCellAdhesionMolecule,Ep-CAMELISA試劑盒人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit人超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
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