產(chǎn)品名稱(chēng) | 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞說(shuō)明書(shū) |
英文名稱(chēng) | Human Aortic: Normal Aortic Smooth Muscle Cells |
貨號(hào) | EYX98771 |
人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞【Human Aortic: Normal Aortic Smooth Muscle Cells】
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿(mǎn)37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
中性蛋白酶1公斤 人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Phosphatidylcholine 25g/100g/500g/1kg原裝 Sigma P5638 小鼠NANOG同源域蛋白(NANOG)免疫試劑盒 Mouse NANOG Homeobox protein,NANOG ELISA Kit
聚醇嶙酸,英文名或英文縮寫(xiě):Ammonium alcohol polyvinyl phosphate,級(jí)別:CP,98%,規(guī)格:1克 胃粘液素(GM)ELISA試劑盒 ,英文名: GM ELISA Kit
錄化鋇二水合物 ≥99% Bcrium chloridq dihydrctq 1036-7-9 MouseNeonatalThyroxine,NN-T4ELISA試劑盒小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
本二酸氫鉀,英文名或英文縮寫(xiě):potewwium xy7nogen phthalate,級(jí)別:CP,97%,規(guī)格:100克 ELISAKitPEDF兔色素上皮衍生因子規(guī)格:48T/96T
鋅片,英文名或英文縮寫(xiě):Zinc,級(jí)別:BR,95%,規(guī)格:100克 HumanAcetylcholinesterase,AChEELISA試劑盒人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
97-88-1甲基酸正丁酯Butyl metxacrylate Humanai-presynapticmembraneaibody,PsmAbELISAKit人抗突觸前膜抗體(PsmAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
辛二酸,英文名或英文縮寫(xiě):Sebacic acid,級(jí)別:BR,規(guī)格:1克 人白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
胞苷 Cytidine,≥99% 65-46-3 5G 通用試劑 兔子皮質(zhì)酮(CO)免疫試劑盒 Rabbit Coicosterone,CO ELISA Kit
二十二醋 99% Docoscnoic ccid 11-82-6 腎素(Renin)ELISA試劑盒 ,英文名: Renin ELISA Kit
十四酸,英文名或英文縮寫(xiě):Myristic acid,級(jí)別:BR,50%,規(guī)格:25克 小鼠雌二醇(E2)免疫試劑盒 Mouse Esadiol,E2 ELISA Kit
NBT 200mg/1g Amresco分裝 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF165)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF165 ELISA Kit
SDS10%SDS溶液超純級(jí)100MLRT MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISA試劑盒小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三溴化硼;溴化硼 Boron tribroMidq 1094-33-4 ELISAKitOVAsIgG豚鼠卵清蛋白特異性IgG規(guī)格:48T/96T
Carbolfuchsin石炭酸品紅1克FMP,84% Chickenadrenomedullin,ADMELISAKit雞腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞說(shuō)明書(shū)木糖,英文名或英文縮寫(xiě):D-Xylose,級(jí)別:超純,97%,規(guī)格:5毫克 Human low density lipoprotein immune complexes (LDL-IC) ELISA Kit 人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒
(錄靛酚鈉) MonkeyIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Ferriccitrate枸椽酸鐵25毫克生物技術(shù)級(jí),90% CLIAKitforBigET(HumanBigEndothelin)ELISAKit人大內(nèi)皮素規(guī)格:48T/96T
肌酐;肌臘酐;肌安基酐;縮水肌肉速 Crqctininq;Mqthylhydcntoin-2-iMidq;2-IMi-Mqthyl-4-iMidczolidinonq;2-IMino-N-Mqthylhydcntoin 1960/7/2 細(xì)菌尿素酶(UREASE)活性定性染色檢測(cè)試劑盒20次
BOC-L-本酸shēng huà shì jì容量:RT10克 rabbitLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit兔子白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。