產(chǎn)品名稱 | 人體卵巢癌組織提取物培養(yǎng) |
英文名稱 | Cancer: Human Ovarian Cancer Derivatives |
貨號 | EYX99369 |
人體卵巢癌組織提取物【Cancer: Human Ovarian Cancer Derivatives】
卵巢癌是女性器官常見的腫瘤之一,發(fā)病率僅次于子和子宮體癌而列居第三位。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體卵巢癌組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
實驗要點及說明;
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點;
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
MOPS 25g/g/0g(R)-Methoxydalbergione46466(R)-甲氧基黃檀醌
MOPSO 25g(R)-Benzyl-oxazolidinone294(R)-芐基-惡唑烷酮
MS干粉培養(yǎng)基不含維生素 Duchefa L (R)-(+)-Amino-methyl,1-diphenyl-butanol866956(R)-(+)-氨基-甲基,1-二苯基-丁醇
MS干粉培養(yǎng)基含維生素 Duchefa L (R)-(+),1'-Bi-naphthol185314(R)-(+),1'-聯(lián)-萘酚
MTT 噻唑蘭 2mg/ 1g(R)-(-)-Benzyl-propionyl-oxazolidinone1316853(R)-(-)-芐基-丙酰基-惡唑烷酮
Dihydrosenkyunolide C 195142-72-4 中文名:二氫洋川芎內(nèi)酯C 分子式:C12H14O3 兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Glyceryl hexacosanoate 127098-14-0 中文名: 分子式:C29H58O4 Rat heme oxygenase 2 (HO-2) ELISA Kit 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒
Digalactosyldiacylglycerol 145033-48-3 中文名:雙半乳糖二酰甘油 分子式:C49H88O15 HumanProinsulin,PIELISAKit 人胰島素原(PI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
4-O-(3-nitropropanoyl)corollin 122475-42-7 中文名: 分子式:C18H24N4O18 HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISA試劑盒人脫氧膠原交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Senkyunolide G 94530-85-5 中文名:洋川芎內(nèi)酯G 分子式:C12H16O3 組織KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次
羥基豨薟精醇 HPLC≥98% 5mg Rat soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒
氧代beta谷甾醇 HPLC≥98% 5mg Rat somal cell derived factor 1 beta (SDF-1 beta /CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒
氧代扁柏脂素 HPLC≥98% 5mg Rat somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒
乙酸,二羥基雙氫黃酮酯 HPLC≥98% 5mg Rat stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒
異戊烯氧基gamma花椒堿 HPLC≥98% 5mg Rat stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒
(),異海松二烯,二醇 HPLC≥98% 5mg Rat tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA試劑盒
羥基蓽澄茄烯酮 HPLC≥98% 5mg Rat telomerase (TE) ELISA Kit 大鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒
Alfa鐵杉脂素 HPLC≥98% 5mg Rat terminal compleme complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 大鼠末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒
Alpha菠菜甾酮 HPLC≥98% 5mg Rat testoterone ELISA Kit (T) 大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒
alpha乳香酸 HPLC≥98% 5mg Rat thioredoxin (x) ELISA Kit 大鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒
人體卵巢癌組織提取物培養(yǎng)高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子肝細(xì)胞生長因子elisa試劑盒 兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒、兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 7-Amino-4-methylcoumarin 26093-31-2 中文名:7-氨基-4-甲基香豆素 分子式:C10H9NO2 度:98.0%
兔子肝細(xì)胞生長因子elisa試劑盒 兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒、兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid 22252-43-3 中文名: 分子式:C8H10N2O3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 7-Acetoxy-4-methylcoumarin 2747/5/9 中文名:7-乙酰氧基-4-甲基香豆素 分子式:C12H10O4 度:95.0% 關(guān)鍵詞:
兔子肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISAKit 7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one 中文名: 分子式:C10H10ClNO
運輸和保存;
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。