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人體直腸癌組織提取物【Cancer: Human Rectum Cancer Derivatives】

直腸癌是胃腸道中常見的惡性腫瘤發病率僅次于胃和食管癌是大腸癌的常見部分（占60％左右）絕大多數病人在40歲以上30歲以下者約占15％男性較多見男女之比為2-3：1，直腸癌是一種生活方式病。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體直腸腺癌組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

細胞培養方法；

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項；

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

pcomb3展示系統套（3組分）/盒Glyburide2381格列本脲

表達性宿主菌XL1-Blue0 ul/支Gliquidone333425格列喹酮

輔助噬菌體VCSM130 ul/支Glimepiride934797格列美脲

噬菌粒pcomb3HSSng/ul，ulGliclazide211878格列齊特

pcomb3HSS展示系統套（3組分）/盒Glaucogenin C mono-D-thevetoside84914
Docetaxel  114977-28-5  中文名：多西他賽  分子式：C43H53NO14    RabbitAmylinELISAKit兔胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Irinotecan hydrochloride  100286-90-6  中文名：鹽酸伊立替康  分子式：C31H35ClN4O6    豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 ，英文名： IFN-γ ELISA Kit

Aminophylline  317-34-0  中文名：氨茶堿  分子式：C16H24N10O4    Human mast cell yptase (MCT) ELISA Kit 人肥大細胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒

Chlorhexidine acetate  56-95-1  中文名：醋酸氯己定  分子式：C26H38Cl2N10O4    rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Carbasalate calcium  5749-67-7  中文名：卡巴匹林鈣  分子式：C19H18CaN2O9    CLIAKitforBeta2-GP1AbIgG(HumanBeta2-Glycoprotein1AibodyIgG)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體IgG規格：48T/96T
球松素查爾酮 HPLC≥98% 5mg rabbitadrencocoicoopichormone,ACTHELISA試劑盒兔子促腎上腺皮質激素(ACTH)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去甲布拉易林 HPLC≥98% 5mg Rabbitai-braiissueaibody,ABAbELISA試劑盒兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去甲絡石甙元 HPLC≥98% 5mg Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISA試劑盒兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去甲氧基去乙酰氧基土槿甲酸 B HPLC≥98% 5mg Rabbitai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去甲氧基矢車菊黃酮素 HPLC≥98% 5mg Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISA試劑盒兔子抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去羥加利果酸 HPLC≥98% 5mg RabbitAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISA試劑盒兔抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去氫克班寧 HPLC≥98% 5mg Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去氫苦木堿 HPLC≥98% 5mg RabbitAmylinELISA試劑盒兔胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去氫魚藤素 HPLC≥98% 5mg Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISA試劑盒兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去氧地膽草素 HPLC≥98% 5mg RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISA試劑盒兔血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒規格：96T/48T
人體直腸癌組織提取物說明書兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒     6-Aminouracil  873-83-6  中文名：6-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2  度：98.0%   

兔子白介素1β(IL-1β)ELISAKit     6-Benzyloxypurine  57500-07-9  中文名：6-芐氧基嘌呤  分子式：C12H10N4O 

兔子白介素10(IL-10)ELISA試劑盒     6-Aminouracil  873-83-6  中文名：6-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2 

兔子白介素10(IL-10)ELISAKit                 6-Benzyloxyindole  中文名：6-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO 

兔子白介素1(IL-1)ELISA試劑盒     6-Aminoquinoxaline  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3  度：98.0%

注意事項；

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。