人胰腺癌組織提取物【Human Cancer: Pancreatic Cancer Tissue Derivatives】

導(dǎo)管腺癌占胰腺癌的80％～90％，主要由分化不同程度的導(dǎo)管樣結(jié)構(gòu)的腺體構(gòu)成，伴有豐富的纖維間質(zhì)。有腺腔樣分化的區(qū)域，可有少量粘液，腫瘤的間質(zhì)含有豐富的和Ⅳ型膠原。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍人胰腺癌組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

PCR反應(yīng)試劑盒(00bp)   次4,5-Dimethoxy-cyanobenzocyclobutane3524

pfu DNA聚合酶   0U/5×0U4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine hydrochloride287831

Real Taq DNA聚合酶   0U /5×0U 4,4'-Dimethoxytrityl chloride61564,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷

Taq plus DNA聚合酶   0U/5×0U4,4'-Diaminodiphenylsulfone84,4'-二氨基二苯砜

M-MLV(RNase H-) 反轉(zhuǎn)錄酶 00U 4,4'-Cyclohexylidenebisphenol84354,4'-環(huán)亞己基雙苯酚
Docetaxel  中文名：多西他賽  分子式：C43H53NO14    豬生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒  

D-Mannitol diacetonide  中文名：  分子式：C12H22O6    豬上腺素(EPI)ELISA試劑盒           

DL-Alanyl-DL-Mine  中文名：DL-丙氨酰-DL-蛋氨酸  分子式：C8H16N2O3S    豬瘦素elisa試劑盒   豬瘦素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬瘦素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬瘦素試劑盒、豬瘦素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

DL-2-Amino-n-octanoic acid  中文名：DL-2-氨基正辛酸  分子式：C8H17NO2    豬食欲素受體elisa試劑盒   豬食欲素受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬食欲素受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬食欲素受體試劑盒、豬食欲素受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Diphenhydramine hydrochloride  中文名：鹽酸苯海拉明  分子式：C17H22ClNO    豬食欲素elisa試劑盒   豬食欲素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬食欲素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬食欲素試劑盒、豬食欲素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
屈螺酮  Drospirenone  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP grade 大鼠γ氨基(GABA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 96T/48T

屈螺酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  Drospirenone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒RatIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T

炔雌醇(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ethiny Estradiol  質(zhì)量規(guī)格：>98%標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 96T/48T

炔雌醇  Ethiny Estradiol  質(zhì)量規(guī)格：>98%,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA檢測(cè)試劑盒RatOrexinAELISAKit 96T/48T

乙硫異煙胺,硫異煙胺  amide  質(zhì)量規(guī)格：>98.5% 大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA檢測(cè)試劑盒RatmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit 96T/48T

乙硫異煙胺,硫異煙胺（標(biāo)準(zhǔn)品）  amide  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠癌標(biāo)志物-CA153試劑盒 Rat mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit

依曲韋林  Etravirine  質(zhì)量規(guī)格：>98% 大鼠艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratiduronatesulfatase,IDSELISAKit 96T/48T

法莫替丁  Famotidine  質(zhì)量規(guī)格：>98% 大鼠白介素10(IL-10)ELISA檢測(cè)試劑盒RatIerleukin10,IL-10ELISAKIT 96T/48T

法莫替丁(標(biāo)準(zhǔn)品)  Famotidine  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 大鼠白介素18(IL-18)Elisa檢測(cè)試劑盒RatIerleukin18,IL-18ElisaKit 96T/48T

非布索坦  Febuxostat  質(zhì)量規(guī)格：≥99% 大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA檢測(cè)試劑盒RatIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 96T/48T
人胰腺癌組織提取物培養(yǎng)γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒              6-Aminoquinoxaline  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3 

兔子β血小板球蛋白elisa試劑盒   兔子β血小板球蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子β血小板球蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子β血小板球蛋白試劑盒、兔子β血小板球蛋白酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  6-Aminoquinoxaline  6298-37-9  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3  度：98.0%   

兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISAKit     4-Amino-N-methylbenzamide  中文名：4-氨基-N-甲基苯甲酰胺  分子式：C8H10N2O  度：98.0%

兔子α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒     6-Aminopenicillanic acid  551-16-6  中文名：6-氨基青霉烷酸  分子式：C8H12N2O3S  度：98.0%   

兔子α2抗纖溶酶elisa試劑盒   兔子α2抗纖溶酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子α2抗纖溶酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子α2抗纖溶酶試劑盒、兔子α2抗纖溶酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  6-Aminonicotinic acid  3167-49-5  中文名：6-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。