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產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人骨骼肌細胞提取物培養 | Human Shoulder Strap Bone: Normal Skeletal Muscle Cells Derivatives | EYX99005 |
人骨骼肌細胞提取物【Human Shoulder Strap Bone: Normal Skeletal Muscle Cells Derivatives】
人骨骼肌細胞提取物是從人原代骨骼肌細胞提取的,人原代骨骼肌細胞從正常人骨骼肌組織制備。正常人骨骼肌組織采集自各地方醫院,采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
實驗事項:
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。
豬口蹄疫病毒A型抗體ELISA檢測試劑盒192Rebeprazole 11797雷貝拉唑鈉
44-Azaandrostan-ene- 3-one7carboxylic acid103
豬口蹄疫病毒亞I型抗體ELISA檢測試劑盒1922-Iodo-oxo-azaandrostane7-carboxylic acid42397
4Lonidamine2649氯尼達明
豬流行性腹瀉抗體ELISA檢測試劑盒Fluticasone propionate4744氟替卡松酯
Periplocoside M 116782-73-1 中文名:北五加皮苷M 分子式:C34H52O9 度:98.0% 關鍵詞: 抗衰老; 抗腫瘤; 杠柳; 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒
Periplocoside F 119902-17-9 中文名: 分子式:C63H104O23 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒
Periplocogenin 112899-63-5 中文名: 分子式:C28H42O6 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
Periplocin 13137-64-9 中文名:杠柳毒苷 分子式:C36H56O13 度:98.5% 關鍵詞: 小鼠緊張素Ⅱ 英文名稱: Angiotensin Ⅱ 規格: 48T/96T 英文縮寫: ANGⅡ
Peri acid 82-75-7 中文名:周位酸 分子式:C10H9NO3S 度:98.0% 小鼠生成素-2 英文名稱: Angiopoietin-2 規格: 48T/96T 英文縮寫: ANG 2
芝麻酚 HPLC≥98% 20mg MouseAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
芝麻林素 HPLC≥98% 20mg MouseAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISA試劑盒小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
芝麻素 HPLC≥98% 20mg Mouseai-thrombieceptor,AELISA試劑盒小鼠抗凝血酶受體(A)ELISA試劑盒規格:96T/48T
知母皂苷A HPLC≥94% 10mg MouseAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規格:96T/48T
知母皂苷A HPLC≥98% 20mg MouseAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA試劑盒小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規格:96T/48T
知母皂苷BII HPLC-ELSD≥95% 20mg Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒規格:96T/48T
知母皂苷BIII HPLC≥98% 10mg Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISA試劑盒小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒規格:96T/48T
知母皂苷C HPLC≥97% 10mg MouseAi-ypsin,ATELISA試劑盒小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒規格:96T/48T
知母皂苷E HPLC≥98% 10mg Mouseai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
梔子苷 HPLC≥98% 20mg Mouseai-zonapellucidaaibody,aZPELISA試劑盒小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人骨骼肌細胞提取物培養cholate 361-09-1 中文名:膽酸鈉 分子式:C24H39NaO5 Human breast and kidney expressed chemokine (BRAK/CXCL14) ELISA Kit 人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒
Chenodeoxycholic acid 474-25-9 中文名:鵝去氧膽酸 分子式:C24H40O4 Humanai-sp100-aibodyELISAKit 人抗sp100抗體(sp100)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Dioscin 19057-60-4 中文名:薯蕷皂苷 分子式:C45H72O16 HumanEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA試劑盒人內皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Pseudoprotodioscin 102115-79-7 中文名:偽原薯蕷皂苷 分子式:C51H82O21 組織PKCγ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Marsdenoside F 858360-61-9 中文名: 分子式:C39H60O14 HumanPansondisease2pan,Park2ELISAKit人帕金森氏病2Pan(Park2)ELISA試劑盒規格:96T/48T
注意事項:
1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。