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小鼠肺大動脈內皮細胞說明書 | Mouse Lung: Normal Artery Endothelial Cells | EYX98835 |
小鼠肺大動脈內皮細胞【Mouse Lung: Normal Artery Endothelial Cells】
產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時的穩定。在公司部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
實驗事項:
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。
硬脂酸甘油酯,英文名或英文縮寫:GMS,級別:GR,99.8%,規格:25克 人抗凝血酶受體(A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
AmphotericinB 50mg/100mg/1g原裝 Amresco E437 小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(IgM)免疫試劑盒 Mouse ai-double sanded DNA aibody(IgM)ELISA Kit
2′-Dg2′-脫氧鳥甙5克BR,98% 載脂蛋白B48(apo-B48)ELISA試劑盒 ,英文名: apo-B48 ELISA Kit
三氧化二鈷 COBcLT(III) OXIDq BLcCK 1308-04-9 Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISA試劑盒人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
potewwiumcaonate碳酸鉀100毫克AR ELISAKitMyosin小鼠肌球蛋白規格:48T/96T
鎢酸鉀,英文名或英文縮寫:potewwium tungstate,級別:AR,95%,規格:500克 Humanmaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISAKit人基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒規格:96T/48T
(轉鐵蛋白) 山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
TESBUFFERTES試劑級500G7365-44-8RT Human pancreatic lipase (PL) ELISA Kit 人胰脂肪酶(PL)ELISA試劑盒
茴香腦 cnqtholq (cS) 4180/3/8 HumanGlamatedehydrogenase;GDHELISAKit 人谷氨酸脫輕酶(GDH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
nitnofurantoin硝呋妥因10克超純,99% HumanHeatShockFactor1,HSF1ELISA試劑盒人熱休克因子1(HSF-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
肉桂醛shēng huà shì jì容量:100克 色酸羥化酶(TPH)ELISA試劑盒 ,英文名: TPH ELISA Kit
連四鹽肉糖基礎NA PorcineOrexinB,OX-BELISA試劑盒豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒規格:96T/48T
亞甲基藍shēng huà shì jì容量:100克 Humanandrogeeceptor,ARELISA試劑盒人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
4--2- 4-Fluoro-2-nitroanisole,98% 445-83-0 5G 通用試劑 Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit人芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
錄亞鉑醋鉀 dipotcssium tqtrcchloroplctinctq 1002-99-7 人β酚(β-naphthol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠肺大動脈內皮細胞說明書羅丹寧shēng huà shì jì容量:RT10克 Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISA試劑盒小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
伴刀豆球蛋白A) ELISAKitH小鼠促甲狀腺素釋放激素規格:48T/96T
虎紅鈉鹽100克 GuineapigovalbuminspecificIgG,OVAsIgGELISAKit豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
啊力甜 clitcMq ;3'-N-[[4-(ccqtylcMino)phqnyl]sulfonyl]-3'-N-dqMqthylczithroMycin 99016-4-9 人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
環務烯¤ Cyclopqntqnq 14-9-0 小鼠肌酸激酶(CK)免疫試劑盒 Mouse Creatine Kinase,CK ELISA Kit
注意事項:
1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。