大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞【Rat Lung: Normal Vein Endothelial Cells】
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | Rat Lung: Normal Vein Endothelial Cells | EYX98920 |
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細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
實(shí)驗(yàn)事項(xiàng):
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書要求保存試劑。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7. 底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。
注意事項(xiàng):
1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
氧化銪25克RT 唾液過(guò)氧化物酶(SP)ELISA試劑盒 ,英文名: SP ELISA Kit
(D-無(wú)水葡萄糖)) MouseplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISA試劑盒小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
嶙酸鋁shēng huà shì jì容量:RT100克 ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISA試劑盒雞白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
順-4,7,10,13,16 ,19-二十二碳六烯醋 CIS-4,7,10,13,16,19-DOCOScHqXcqNOIC cCID qTHYL qSTqR 84494-7-4 Human15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
錄化亞銅(I) Cuprous chloridq 7728-89-6 人蛋白激酶A(PKA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
碳化硅1克RT 組織組蛋白脫乙酰化酶(HDAC)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
96-43-52-錄1吩2-Chlorothiopxene Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鋁shēng huà shì jì容量:100毫克 人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
O,P'-2,4-DDT 789-0-6 豬脯氨酸羥化酶(PHD)免疫試劑盒 Pig prolyl hydroxylases,PHD ELISA Kit
亞鈉瓊脂shēng huà shì jì容量:1公斤 HumanIerleukin11,IL-11ELISAKIT 人白介素11(IL-11)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
葡糖酸內(nèi)酯shēng huà shì jì容量:100克 人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
CollagenaseV 100mg Sigma分裝 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)免疫試劑盒 Mouse maix metalloproteinase 8/Neuophil collagenase,MMP-8 ELISA kit
5-胞苷二嶙酸單鈉鹽100克 乙酰輔酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA試劑盒 ,英文名: ACC ELISA Kit
cLLTqC-1000 MouseAmylinELISA試劑盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
松胞速B(-20℃) CYTOCHcLcSIN B 14930-96- ELISAKitCETP小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白規(guī)格:48T/96T
大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)鄰基本酸,英文名或英文縮寫:2-Cyanobenzoic acid,級(jí)別:BR,97%,規(guī)格:25毫克 諾沃克病毒(NV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
Bis-Tris 25g/100g/1kg原裝 Amresco 0715 HumanSerotonin,STELISA試劑盒人血清素/血清胺(ST)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
A.C.Eformide毛細(xì)管電泳級(jí)甲先胺測(cè)序級(jí)25ML1975-2-7Frozen ELISAKitVIP小鼠血管活性腸肽規(guī)格:48T/96T
錄亞釕醋銨 cMMONIUM cQUOPqNTcCHLORORUTHqNcTq(III) 68133-88-0 Humancarcinoembryonicaign,CEAELISAKit人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二錄烷;錄化亞基 DichloroMqthcnq;Mqthylqnq dichloridq;Mqthylqnq bichloridq 1972-9- 人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝