人胃癌組織提取物【Cancer: Human Stomach Cancer Derivatives】

胃癌是消化道中常見的惡性腫瘤，按組織結(jié)構(gòu)的不同可以分為粘液癌、腺癌、未分化癌和特殊類型癌四種。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體人胃癌組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

SMCC0mgTolazoline hydrochloride597鹽酸妥拉唑林

Sulfo-SMCCmgMeclizine hydrochloride142鹽酸美克洛嗪

3-Maleimidopropionic acid N-hydroxysuccinimide ester0mg6-(5-Chloropyridin-yl)-hydroxy,7-dihydroH-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-one41

Fluorescein-maleimide25mg佐匹克隆

Tetramethylrhodamine-(and)-maleimide *Mixed isomers*25mgCapecitabine 2',3'-diacetate162
Emtricitabine  143491-57-0  中文名：恩曲他濱  分子式：C8H10FN3O3S    人Apelin36elisa試劑盒   人Apelin 36試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人Apelin 36試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人Apelin 36試劑盒、人Apelin 36 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Dasatinib  302962-49-8  中文名：達(dá)沙替尼  分子式：C22H26ClN7O2S    雞白介素4elisa試劑盒   雞白介素4試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   雞白介素4試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：雞白介素4試劑盒、雞白介素4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Zolpidem    中文名：坦  分子式：C19H21N3O    小鼠泰澤病原體elisa試劑盒   小鼠泰澤病原體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠泰澤病原體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠泰澤病原體試劑盒、小鼠泰澤病原體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Repaglinide ethyl ester  147770-06-7  中文名：  分子式：C29H40N2O4    人著絲粒蛋白B(CENPB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human CENPB (Cenomere Protein B) ELISA Kit

3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid  99469-99-5  中文名：  分子式：C13H16O5    人中心體蛋白110(CEP110)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human CEP110 (Cenosomal Protein 110kDa) ELISA Kit
人參炔醇 HPLC≥98% 5mg HISTONEH3蛋白共沉淀分析試劑盒5

人參三醇 HPLC≥98% 20mg HIS標(biāo)記蛋白Ni-A樹脂再生試劑盒20

人參皂苷 Rg HPLC≥98% 20mg HIS標(biāo)記蛋白化試劑盒5

人參皂苷 Rg HPLC≥98% 20mg HIS標(biāo)記蛋白擴(kuò)增試劑盒10

人參皂苷CK HPLC≥98% 20mg HIS釣餌(PULLDOWN)檢測試劑盒5

人參皂苷F HPLC≥98% 20mg HMMA高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒20

人參皂苷F HPLC≥98% 20mg HOECHST33342和PROPIDIUMIODIDE細(xì)胞膜變檢測試劑盒50

人參皂苷F HPLC≥98% 10mg Hollande固著液50毫升

人參皂苷F HPLC≥98% 20mg HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒2

人參皂苷Rb HPLC≥98% 20mg HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒2
人胃癌組織提取物培養(yǎng)兔損傷分子-1(rabbit Kim-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  67219-55-0  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷  分子式：C37H35N3O7 

兔素(Renin)ELISA試劑盒     5-Benzyl D-glutamate  2578-33-8  中文名：D-谷氨酸5-苯甲酯  分子式：C12H15NO4  度：98.0%   

兔素(Renin)ELISAKit     5-Benzoylpentanoic acid  4144-62-1  中文名：5-苯甲酰基戊酸  分子式：C12H14O3  度：98.0%   

兔素(rabbit Renin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Aminosalicylic acid  中文名：4-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%

兔瘦素(rabbit Leptin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-Hydroxymethylfurfural  中文名：5-羥甲基糠醛  分子式：C6H6O3  度：%

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。