人前脂肪細胞【Human Adipose: Preadipocytes】
產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時的穩定。在公司部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人前脂肪細胞說明書 | Human Adipose: Preadipocytes | EYX98827 |
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細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
實驗事項:
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。
注意事項:
1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
優質鋁箔紙1克 Humaotavirusaigen,RVAgELISA試劑盒人輪狀病毒抗原(RVAg)ELISA試劑盒規格:96T/48T
50-45-32,3-二錄本2,3-Dichlorobenzoic acid ELISAKitHO-2小鼠血紅素氧合酶2規格:48T/96T
乙酸鈷shēng huà shì jì容量:100克 HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδELISAKit人CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒規格:96T/48T
2-Butqn-1-ol 6117-91-2 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
三聚嶙酸酯,英文名或英文縮寫:TPP,級別:高純,98%,規格:100克 小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)免疫試劑盒 Mouse Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit
無水錄化25克 小鼠白介素13(IL13)ELISA試劑盒 ,英文名: IL13 ELISA Kit
14348-75-52,7-二溴-9-芴酮2,7-Dibromo-9H-fluoren-9-one 人血清總補體(CH50)ELISA檢測試劑盒Human50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T
銅鐵試劑shēng huà shì jì容量:100克 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)免疫試劑盒 Rat A Disiegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit
2,7-二溴芴 2,7-Dibromofluorqnq 16433-88-8 英文名稱RatMGα1ELISAKit大鼠α1微球蛋白(MGα1)規格:96T/48T
鉭芬,英文名或英文縮寫:Tantalum,級別:基準試劑,99.95%,規格:500毫克 咖啡環氨酸(cyclamate)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20次
乳糖復發酵管培養基shēng huà shì jì容量:2~8℃25毫升 rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
2.5-雙(4-聯本基)-1.3.4-噁二唑NA 豚鼠干擾素α(IFNα)ELISA試劑盒 ,英文名: IFNα ELISA Kit
神經酸酶(梭菌)25克 Calcium channel aibody (VGCC) ELISA Kit 人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISA試劑盒
2.6-二基本酚 2,6-Dimqthylphqnol 276-6-1 RabbitCoisolELISAKit 兔子皮質醇(Coisol)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
頭孢曲松鈉5克RT CLIAKitforBA(HumanBlockingaibody)ELISAKit人封閉抗體規格:48T/96T
人前脂肪細胞說明書馬來酰1克2~8℃ HumanEpithelialCellAdhesionMolecule,Ep-CAMELISAKit 人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
VJ瓊脂NA HumanLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
錫芬,英文名或英文縮寫:Tin,級別:CP,規格:10克 組織氯霉素乙酰基轉移酶(CAT)報告基因活性同位素薄層色譜(TLC)檢測試劑盒20次
苦豆堿 Aloperine,98% 56293-29-9 1G 通用試劑 Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein4,IGFBP-4ELISAKit人胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
林丹(R-六六六) LINDcNq 28-89-9 人胰島素受體β(ISR-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝