以下是解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒說明書的訂購信息:
產(chǎn)品名稱 | 編號 | 分類 |
解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒說明書 | EY00P1185 | PCR檢測試劑盒 |
組成及試劑配制:
1、解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒說明書酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
需要自備的器材:
1.解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒說明書儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒說明書具有下列特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
血管內(nèi)皮生長因子121(VEGF121)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
血管內(nèi)皮生長因子121(VEGF121)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
血管內(nèi)皮生長因子121(VEGF121)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
血管內(nèi)皮生長因子145(VEGF145)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
血管內(nèi)皮生長因子165(VEGF165)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
促甲狀腺素釋放激素(TRH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
促甲狀腺素釋放激素(TRH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
促生長激素釋放激素(GHRH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
促生長激素釋放激素(GHRH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
促生長激素釋放激素(GHRH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
促生長激素釋放激素(GHRH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) * 規(guī)格: 48T/96T
解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒說明書* Cystatin C Mouse Monoclonal Antibody(3C6) 胱抑素C 小鼠單克隆抗體(3C6)
* Cystatin C Mouse Monoclonal Antibody(3B12) 胱抑素C 小鼠單克隆抗體(3B12)
* TRY2 Polyclonal Antibody 胰蛋白酶2 多克隆抗體
* GLP2R Polyclonal Antibody 胰高血糖素樣肽2受體 多克隆抗體
* GLP1R Polyclonal Antibody 胰高血糖素樣肽1受體 多克隆抗體
* INSL6 Polyclonal Antibody 胰島素樣蛋白6 多克隆抗體
* INSL5 Polyclonal Antibody 胰島素樣蛋白5 多克隆抗體
反應(yīng)五要素:
解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒說明書參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。