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小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物【Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Mucosa Epithelial Cell Derivatives】

小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物是從小鼠小腸粘膜上皮細胞提取的，小鼠小腸粘膜上皮細胞從正常小鼠小腸粘膜組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

細胞培養(yǎng)方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預(yù)孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進行下步操作，任何時侯都應(yīng)避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。
    如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

慶大霉素殘留檢測試紙條Benzotetramisole88517苯并四咪唑

β-內(nèi)酰胺類藥物殘留檢測試紙條Benzopinacol4642苯頻哪醇

β-內(nèi)酰胺酶殘留檢測試紙條Benzophenone1191二苯甲酮

氟喹諾酮類藥物殘留檢測試紙條Benzoin1193安息香

喹諾酮類藥物殘留檢測試紙條Benzoin oxime4418安息香肟
Methyl (3R)-3-(tert-butyldimethylsilyloxy)-5-oxo-6-triphenylphosphoranylidenehexanoate  147118-35-2  中文名：  分子式：C31H39O4PSi    人組織蛋白酶Kelisa試劑盒   人組織蛋白酶K試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人組織蛋白酶K試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶K試劑盒、人組織蛋白酶K elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl  114772-54-2  中文名：  分子式：C14H10BrN    人組織蛋白酶Delisa試劑盒   人組織蛋白酶D試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人組織蛋白酶D試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶D試劑盒、人組織蛋白酶D elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

1-Chloroethyl cyclohexyl carbonate  99464-83-2  中文名：  分子式：C9H15ClO3    人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒  

Methyl 2-ethoxybenzimidazole-7-carboxylate  150058-27-8  中文名：  分子式：C11H12N2O3    人組織蛋白酶B(cath-B)ELISA試劑盒  

1-Ethyl-3-nitrophthalate  16533-45-2  中文名：  分子式：C10H9NO6    人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒
鹽酸魯拉西酮  Lurasidone HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA檢測試劑盒rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 96T/48T

鹽酸魯拉西酮(標準品)  Lurasidone HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISA檢測試劑盒rabbitneuroophin3,-3ELISAKit 96T/48T

櫻黃素(標準品)  Prunetin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA檢測試劑盒rabbitneuroophin4,-4ELISAKit 96T/48T

香橙素(標準品)  Aromadendrin(Dihydrokaempferol)  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品 兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA檢測試劑盒Rabbitadrenomedullin,ADMELISAKit 96T/48T

3',4',7-三羥基黃酮(標準品)  3',4',7-Trihydroxyflavone  質(zhì)量規(guī)格：>97%,標準品 兔子生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA檢測試劑盒RabbitGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 96T/48T

地克珠利  Diclazuril  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 兔子視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA檢測試劑盒Rabbietinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit 96T/48T

美他環(huán)素,甲烯土霉素(標準品)  Metacycline HCl;Methacycline HCl  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品 兔子瘦素(LEP)ELISA檢測試劑盒rabbitLeptin,LEPELISAKit 96T/48T

美他環(huán)素,甲烯土霉素鹽酸鹽  Metacycline HCl;Methacycline HCl  質(zhì)量規(guī)格：potency>877U per mg 兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA檢測試劑盒Rabbitmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 96T/48T

己二酸二  Adipic dihydrazide  質(zhì)量規(guī)格：>98% 兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISA檢測試劑盒rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 96T/48T

alpha-亞麻酸(標準品)  Linolenic acid  質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%(GC),分析標準品 兔子脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA檢測試劑盒rabbitDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit 96T/48T
小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物白細胞活化黏附因子   英文名稱：   Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ALCAM  3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one  中文名：  分子式：C29H48O2  度：%

白細胞分化抗原14   英文名稱：   cluster of differeiation aigen 14   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CD14  Dihydrosenkyunolide C  195142-72-4  中文名：二氫洋川芎內(nèi)酯C  分子式：C12H14O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

白介素-1β   英文名稱：   ierleukin-1β   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-1β  Testosterone undecanoate  5949-44-0  中文名：十一酸睪酮  分子式：C30H48O3 

白介素-1α   英文名稱：    ierleukin-1α   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-1α  Testosterone undecanoate  5949-44-0  中文名：十一酸睪酮  分子式：C30H48O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

巴氏染液（脫落細胞染色）   Name  3-Amino-3-phenyl-1-propanol  中文名：3-氨基-3-苯基-1-丙醇  分子式：C9H13NO  度：98.0%

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。