小鼠結腸平滑肌細胞提取物【Mouse Intestine: Normal Colonic Smooth Muscle Cell Derivatives】
小鼠結腸平滑肌細胞提取物是從小鼠結腸平滑肌細胞提取的,小鼠結腸平滑肌細胞從正常小鼠結腸組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
產品名稱 | 小鼠結腸平滑肌細胞提取物培養 |
英文名稱 | Mouse Intestine: Normal Colonic Smooth Muscle Cell Derivatives |
貨號 | EYX99117 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
通用型單重熒光PCR 檢測試劑盒48Minocycline hydrochloride136148
高致病性H5N1病毒雙重熒光PCR 檢測試劑盒48Nisoldipine636752尼索地平
H5N2病毒雙重熒光PCR 檢測試劑盒48Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate17386
H5病毒單重熒光PCR檢測試劑盒482-Benzylacrylic acid56699
H7病毒單重熒光PCR檢測試劑盒48Racecadotril8113消旋卡多曲
Methasterone 3381-88-2 中文名:甲基屈他雄酮 分子式:C21H34O2 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒
Metamizole 68-89-3 中文名:安乃近 分子式:C13H16N3NaO4S 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠脫氫表雄酯(DHEA-S)ELISA試劑盒
Mesterolone 1424-00-6 中文名:甲氫睪酮 分子式:C20H32O2 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠脫氫表雄S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒
Mestanolone 521-11-9 中文名:美雄諾龍 分子式:C20H32O2 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠脫氧酚elisa試劑盒 小鼠脫氧酚試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠脫氧酚試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠脫氧酚試劑盒、小鼠脫氧酚eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
Mequindox 13297-17-1 中文名:乙酰甲喹 分子式:C11H10N2O3 度:98.0% 小鼠粘蛋白elisa試劑盒 小鼠粘蛋白試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠粘蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠粘蛋白試劑盒、小鼠粘蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
鹽酸鑭六水(>99%,BR) Lanthanum (III) chloride, hexahydrate 質量規格:>99%,BR 動物組織肌質網橫小管(TTube)分離試劑盒10
三氧化鉬(>98%,BR) Molybdic oxide 質量規格:>98%,BR 動物組織肌質網三聯體(IAD)分離試劑盒10
木瓜蛋白酶懸浮液 Papain 2x crystallized from papaya Latex 質量規格:比活度:>20 U/mg,BC 動物組織基因組DNA分離試劑盒50
苯磺酸鈉(>98%,BR) benzenesulfonate 質量規格:>98%,BR 動物組織鎂ATP酶(Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20
過氧化物歧化酶(SOD) Superoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD) 質量規格:比活度:>5000 U/mg,BC 動物組織膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒20
三十烷醇(>98%,植物激素級) Triacontanol 質量規格:>98%,植物激素級 動物組織內質網粗提分離試劑盒10
4-羥基(>98.0%,BR) 4-Hydroxybenzaldehyde 質量規格:>98.0%,BR 動物組織羥脯氨酸(hydroxyproline)比色法定量檢測試劑盒20
低內牛血清白蛋白 Albumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin 質量規格:>97%,Biotech Grade 動物組織羥脯氨酸(HYP)比色法定量檢測試劑盒20
梭菌蛋白酶 Clostripain 質量規格:酶活:>50U/mg,進分 動物組織氫/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20
2'-脫氧鳥苷-5'-一二鈉鹽(分子生物學級) dGMP, 2'-Deoxyguanosine-5'-monophosphate di salt 質量規格:>98%,分子生物學級 動物組織氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20
小鼠結腸平滑肌細胞提取物培養表皮生長因子 英文名稱: epidermal growth factor 規格: 48T/96T 英文縮寫: EGF 3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 14858-07-2 中文名: 分子式:C28H44O3
便攜式余/總比色計 Poable / total colorimeter 4-(N-Methyl)-aminoantipyrine 中文名: 分子式:C12H15N3O 度:95.0%
便攜式亞鹽比色計 Poable niite colorimeic meter 4-(N-Methyl)-aminoantipyrine 中文名: 分子式:C12H15N3O
便攜式臭氧比色計 Poable ozone colorimeic meter 4-(Phenylthio)benzyl alcohol 6317-56-2 中文名: 分子式:C13H12OS
半乳糖凝集素 7 ( Galectin-7 ) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Aspirin 中文名:阿司匹林 分子式:C9H8O4 度:99.0%