人膀胱組織提取物【Human Bladder :Normal Bladder Derivatives】

膀胱是一個儲尿器官。在哺乳類，它是由平滑肌組成的一個囊形結構，位于骨盆內，其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

Thiourea    g Cyromazine662157環丙氨嗪

Thymine 胸腺嘧啶   5gDiclazuril18317地克珠利

Timentin   1g/5g Toltrazuril6043托曲珠利

TMB 3,3’5,5’-四甲基胺   1gClopidol297氯吡多

TMB 2HCl 3,3’5,5’-四甲基胺 2mg/ 1gParoxetine hydrochloride782469鹽酸帕羅西汀
Ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one  中文名：麥角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮  分子式：C28H40O  度：96.5%  兔核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒   兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒   規格型號：96T/48T   兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒、兔核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Paris Saponin VII  中文名：重樓皂苷VII  分子式：C51H82O21  度：98.0%  兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γelisa試劑盒   兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ試劑盒   規格型號：96T/48T   兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ試劑盒、兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

Polyphyllin D  中文名：重樓皂苷D  分子式：C44H70O16  度：98.0%  兔環0酸鳥苷(rabbit cGMP)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

Sitostenone  中文名：豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O  度：96.0%  兔C反應蛋白(rabbit CRP)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one  中文名：6β-羥基豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O2  度：95.0%  兔軟骨寡聚基質蛋白(rabbit COMP)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝
乳清酸  Orotic acid  質量規格：>98%(T),BR 人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA檢測試劑盒Humancardiacisoformofopni,cELISAKit 96T/48T

氟尼酸(標準品)  Niflumic acid  質量規格：>98%,標準品 人心肌轉錄因子GATA4ELISAKit人心肌轉錄因子GATA4ELISAKit，48T/96T人心肌轉錄因子GATA4ELISAKit，48T/96T規格：48T/96T

木聚糖  XYLAN  質量規格：>95%,來源于玉米芯,溶于水 人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)ELISA檢測試劑盒Humanheafattyacidbindingprotein,h-FABPELISAKit 96T/48T

阿特拉津,莠去津  Atrazine  質量規格：>97% 人型肝炎IgG(HCV-IgG)試劑盒 Human Hepatitis C virus IgG,HCV-IgG ELISA Kit

丁苯羥酸  Bufexamac  質量規格：>99%,BR 人型肝炎IgM(HCV-IgM)試劑盒 Human Hepatitis C virus IgM,HCV-IgM ELISA Kit

3-甘油酸激酶  3-Phosphoglyceric Phosphokinase  質量規格：1000u/mg,Sigma分裝 人型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCV core Ag)試劑盒 Human Hepatitis C Virus (HCV) Core Aigen,HCV core Ag ELISA kit

1,5-二-D-核酮糖/1,5二核酮糖  d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP  質量規格：90.0%,Sigma 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA檢測試劑盒Humahymus-leukemiaaigen,TLaELISAKit 96T/48T

酸性蛋白酶；蛋白酶來自佐氏曲霉  Acidic Protease from Aspergillus   質量規格：BR,50u/mg 人胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)ELISA檢測試劑盒Humahymusexpressedchemokine,TECKELISAKit 96T/48T

撲草凈  Prometryn  質量規格：>95%,BR 人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)ELISA檢測試劑盒Humahymusindependeaigen,TI-AgELISAKit 96T/48T

蘿卜硫素；萊菔硫烷(標準品)  Sulforaphane  質量規格：HPLC≥95%,標準品 人胸腺肽(Thymosin)ELISA檢測試劑盒HumahymosinELISAKit 96T/48T
人膀胱組織提取物價格兔凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISAKit     6-Aminouracil  中文名：6-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2  度：98.0%

兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體elisa試劑盒   兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒   規格型號：96T/48T   兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒、兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  5-Aminofluorescein  3326-34-9  中文名：5-氨基熒光素  分子式：C20H13NO5  度：98.0%  關鍵詞： 

兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒     5-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  119-79-9  中文名：5-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S  度：98.0%   

兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISAKit     5-Ami-(2-hydroxyethyl)pyrazole  73616-27-0  中文名：  分子式：C5H9N3O 

兔尿激酶型纖溶酶原激活物elisa試劑盒   兔尿激酶型纖溶酶原激活物試劑盒   規格型號：96T/48T   兔尿激酶型纖溶酶原激活物試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔尿激酶型纖溶酶原激活物試劑盒、兔尿激酶型纖溶酶原激活物elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  5-Aminofluorescein  3326-34-9  中文名：5-氨基熒光素  分子式：C20H13NO5

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。