大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物【Rat Lung: Normal Artery Fibroblast Derivatives】

大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物是從大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取的，大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞從正常大鼠肺動(dòng)脈組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

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細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

實(shí)驗(yàn)事項(xiàng)：

1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時(shí)，請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí)，一次不要小于10μl)，以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請(qǐng)避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項(xiàng)：

1. 接收到，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

雞鴨鵝通用性病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒96T*2Fludarabine216794氟達(dá)拉賓

雞新城疫抗體ELISA檢測(cè)試劑盒96TFloribundone 11185554

病毒H7亞型抗原檢測(cè)試紙條卡/包，包/盒Florfenicol732314尼考

病毒H5亞型抗體檢測(cè)試紙條卡/包，包/盒Fingolimod1623595芬戈莫德

雞病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒96TFingolimod hydrochloride1623596鹽酸芬戈莫德
HumanEamoebahistolyticaAigenELISA試劑盒人痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (2R,3S)-3-Phenylisoserine ethyl ester  中文名：  分子式：C11H15NO3 

HumanE3/ubiquitin-proteinligase,E3/UBPLELISA試劑盒人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,2-Bis(phenylthio)ethane  中文名：1,2-雙(苯硫基)乙烷  分子式：C14H14S2 

HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISA試劑盒人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,2-O-Isopropylidene-β-D-fructopyranose  66900-93-4  中文名：  分子式：C9H16O6 

HumanE1/ubiquitin-activatingenzyme,E1/UBAEELISA試劑盒人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene  中文名：1,3-雙(4,5-二氫-2-惡唑)苯  分子式：C12H12N2O2 

HumandysophinELISA試劑盒人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene  3073-87-8  中文名：1,4-二[2-(4-甲基-5-苯基惡唑基)]苯  分子式：C26H20N2O2
外消旋4-羥基-9-順式-視黃酸  rac 4-Hydroxy-9-cis-retinoic Acid  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱Mouseα1-AcidglycoproteinELISAKit小鼠α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)規(guī)格：96T/48T

籠形視黃酸  Caged Retinoic Acid  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱Mouseα-L-fucosidaseausefulELISAKit小鼠α-L-巖藻糖苷酶(AFU)規(guī)格：96T/48T

5,6-環(huán)氧-13-順式視黃酸  5,6-Epoxy-13-cis Retinoic Acid  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱Mouseβ2-GP1Ig(A,G,M)ELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗體Ig(A,G,M)(β2-GP1)規(guī)格：96T/48T

外消旋全反式4-羥基視黃酸   rac all-trans 4-Hydroxy Retinoic Acid   質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱Mouseβ-ThromboglobulinELISAKit小鼠β血小板球蛋白(β-TG)規(guī)格：96T/48T

9-順式視黃醇β-D-葡萄糖苷酸  9-cis Retinoyl β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱-proBNP腦肽規(guī)格：96T/48T

4-酮基9-順式-甲酯視黃酸  4-Keto 9-cis Retinoic Acid Methyl Ester  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligandELISAKit大鼠核因子活化因子受體配體(RANKL)規(guī)格：96T/48T

全反式 5,6-環(huán)氧視黃酸  all-trans 5,6-Epoxy Retinoic Acid  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligandELISAKit大鼠核因子活化因子受體配體(RANKL)規(guī)格：96T/48T

9-順式-視黃酸  9-cis-Retinoic acid  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RaesistinElisakit大鼠抵抗素(Resistin)Elisakit規(guī)格：96T/48T

4-酮基13-順式-視黃酸  4-Keto 13-cis-Retinoic Acid  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RaesistinElisakit大鼠抵抗素(Resistin)Elisakit規(guī)格：96T/48T

4-酮基9-順式視黃酸  4-Keto 9-cis Retinoic Acid  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱RatAbELISAKit大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)規(guī)格：96T/48T
大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物人皰疹病毒6型(HHV-6)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Annonacin  中文名：  分子式：C35H64O7  度：97.0%

人凝血因子V抗原   英文名稱：   Human Vcoagulation factor 5 Aigen   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   F5-Ag  4-[2-[(3-Ethyl-4-methyl-2-oxo-3-pyrrolin-1-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide  中文名：  分子式：C16H21N3O4S 

人凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISAKit     Capecitabine  中文名：卡培他濱  分子式：C15H22FN3O6  度：98.0%

人凝血酶(TM)ELISAKit     Capecitabine 2',3'-diacetate  162204-20-8  中文名：  分子式：C19H26FN3O8 

人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISAKit                 2-Aminonicotinic acid  中文名：2-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2