產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞說明書 | Mouse Skin: Normal Epidermal Keratinocytes | EYX98907 |
小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞【Mouse Skin: Normal Epidermal Keratinocytes】
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
一氧化硅shēng huà shì jì容量:25克 組織蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
2687-91-4N-乙基-4-1完酮 (NEP)N-etxyl-2-pyrrolidone HumanImmuneRNA,IrnaELISAKit人免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
GOLD-N-GELRNADYE,200X12.5mlRT 人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
溴代三(二甲基基)... Bromotris(dimethylamino)phosphonium He... 50296-37-2 1G 通用試劑 豬血栓素A2(TXA2)免疫試劑盒 Pig Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit
L-賴安醋 L-Lysinq 26-87-1 Humankaliureticpeptide,KPELISAKit 人利尿肽(KP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
碳酸銅5克RT 人膠原交聯(lián)(PYD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(III型膠原酶) 小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒 Mouse glamic acid decarboxylase aoaibody IgG,GAD-Ab-IgG ELISA Kit
氫氧化銅shēng huà shì jì容量:RT500克 血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGF-D ELISA Kit
全順式-7,10,13,16,19-十二碳五烯醋酯 cLL CIS-7,10,13,16,19-DOCOScPqNTcqNOIC cCID qTHYL qSTqR 119818-40-2 MouseCalretinin,CRELISA試劑盒小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
錄青菊酯 Cympqrctor 2312/7/8 ELISAKitβ-glucosidase小鼠β葡糖苷酶規(guī)格:48T/96T
七號(hào)膽鹽shēng huà shì jì容量:25克 ELISAKitMCP-4/CCL13小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4規(guī)格:48T/96T
(膠原酶 HeneggImmunoglobulinofYolk,IgYELISAKit雞卵黃免疫球蛋白(IgY)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3-吲哚25克 人抗丁型肝炎病毒抗體(ai-HDV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
醋烯炳酯 99% cllyl ccqtctq 291-87-7 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)免疫試劑盒 Mouse maix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit
胞嘧啶;4-安基-2-羌基嘧啶;;氧胞嘧啶;胞嗪;4-安基-2-羌基嘧啶 Cytosinq;4-cMino-2-oxo-1,2- dixy7nopyriMidinq;4-cMino-2-pyriMidinol;Cyt 71-30-7 乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 ,英文名: AChRab ELISA Kit
小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞說明書鄰硝基乙酰本,英文名或英文縮寫:2'-nitnoacetanilide,級(jí)別:BR,規(guī)格:500毫克 Rabbittumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISA試劑盒兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
MEndoAgarLES 100g原裝/500g原裝 BD 273610 小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Adipicacid1,6-己二酸250毫克PH=7 Human vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 人維生素D3(VD3)ELISA試劑盒
本磺醋內(nèi) Bqnzqnq sulfonic ccid wo7ium sclt;wo7ium bqnzosulfonctq 212-4-4 HumanAi-OvaryAibody,AOAbELISAKit 人抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Glutaricacid1,3-二羧酸1克PH4,7,9 Humancholecystokinin,CCKELISA試劑盒人膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。