產品屬性：
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
ICL異檸檬酸裂解酶檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63483 |
商品介紹：
測定意義
ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中，油料作物種子在萌發過程中，通過乙醛酸循環及其他過程將脂肪轉變成碳水化合物。ICL是乙醛酸循環的關鍵酶之一。
測定原理：
ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD，NADH在340nm下有特征吸收峰，監測340nm吸光度的減小速率可間接反應ICL活性。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
產品內容：
公司產品僅用于科研酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
堿性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存
試劑三：粉劑×1 支，-20℃保存，用時加入 1.6mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；
試劑四：粉劑×1 支，4 ℃保存，用時加入 1.9mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；
試劑五：液體 0.7mL×1 支，4 ℃保存；
試劑六：液體 10mL×1 瓶，4 ℃保存；
試劑七：自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
操作步驟：
一、NAD+和 NADH 的提取：
1、血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min；取上清 200uL，加入等體積堿性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清，冰上保存待測。
NADH 的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 堿性提取液，煮沸 5min(蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積堿性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 堿性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取：
NAD+的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 堿性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。
下列是公司正在熱銷的產品：
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ICL異檸檬酸裂解酶檢測試劑盒微量法乙甲酯 ≥99%(GC)四氫芳樟 98%Anti-EGF 表皮生長因子抗體（大鼠）
乙甲酯 for HPLC, ≥99.5% (GC)四氫香葉 98%Anti-EGFL7 類表皮生長因子域7抗體
乙甲酯 無水級, 99.5%麝香草 ≥99%, FCCAnti-EGFR 表皮生長因子受體抗體
肉桂甲酯 99%10-十一烯 98%Anti-EF1 Alpha 延伸因子EF-1a抗體
肉桂甲酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG桃 98%Anti-EGFRvIII 表皮生長因子受體III型突變體抗體
甲酯 99%10-十一烯 97%Anti-Egr-1 早期生長應答蛋白1抗體
甲酯 ≥99%, FCC10-十一烯 FG，≥90%Anti-eIF2 alpha 真核啟動因子2α抗體
癸甲酯 Standard for GC ,≥99.5% (GC) 丁位十一內酯 98%Anti-Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 磷化真核啟動因子2α抗體
注意事項：
1、操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加，必須分開加。
2、反應過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時，建議稀釋后測量，計算公式中應當乘以稀釋倍數。
