商品介紹:
測定意義
甜菜堿是一種廣泛分布于動植物及微生物體內的季銨型水溶性生物堿,是生物體內膽的氧化產物,可以增強免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤,并可作為甲基供體,參與促進動物蛋白質和脂肪代謝、增進食欲、緩和應激、調節滲透壓、穩定維生素等多種生物作用,在化工、醫藥、食品添加劑等領域有較廣泛的應用。
測定原理
甜菜堿在強酸條件下和雷氏鹽發生反應產生沉淀,沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液,在525nm處有特征吸收峰,測定525nm處的吸光值,可得樣品的甜菜堿含量。
自備實驗用品及儀器
天平、離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、甲醇、鹽酸和蒸餾水。
產品屬性:
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
甜菜堿含量檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63813 |
產品內容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
注意事項:
1、公司產品僅用于科研操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時,建議稀釋后測量,計算公式中應當乘以稀釋倍數。
下列是公司正在熱銷的產品:
107kDa肌多聚磷-4-磷Ⅰ型(INPP4A)檢測試劑盒(聯吸附試驗法)光帽鱗傘Sheep 5-NT (5-Nucleotidase) ELISA Kit
107kDa肌多聚磷-4-磷Ⅰ型(INPP4A)檢測試劑盒(聯吸附試驗法)腸桿屬Sheep PICK1 (Protein Interacting With Protein Kinase C, Alpha 1)ELISA Kit
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MutY同源物(MUTYH)檢測試劑盒(聯吸附試驗法)膠孢Sheep TUBβ (β-Tubulin) ELISA Kit
激活蛋白C(APC)檢測試劑盒(聯吸附試驗法)黃桿Sheep GMP-140 (Alpha-granular Membrane Protein) ELISA Kit
激活蛋白C(APC)檢測試劑盒(聯吸附試驗法)新日本靈芝Sheep PKM2 (Pyruvate Kinase, Muscle) ELISA Kit
嗜鉻蛋白B(CHGB)檢測試劑盒(聯吸附試驗法)燼灰鏈霉Sheep RXFP1 (Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1) ELISA Kit
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人內質網應激相關蛋白CHOPAnti-MPHOSPH9 Antibody人絲裂原激活蛋白激(MAPK)elisa定量檢測試劑盒
大鼠Ⅰ型膠原C端肽Anti-MPL/TPOR Antibody人輕肽鐵蛋白(FTL)elisa定量檢測試劑盒
人可溶性瘦受體Anti-MPRIP Antibody人細絲蛋白Bβ(FLNβ)elisa定量檢測試劑盒
小鼠抗PSGL-1/CD162 ELISA KitAnti-MRC1 Antibody人髓分化因子88(MyD88)elisa定量檢測試劑盒
家蠶卵黃蛋白Anti-MPO Antibody人糖化血紅蛋白(HbA1c)elisa定量檢測試劑盒
兔抗腦組織抗體Anti-MRC1 Antibody人特異性巨噬武裝因子(SMAF)elisa定量檢測試劑盒
蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原Anti-MRE11 Antibody人纖溶抑制因子(TAFI)elisa定量檢測試劑盒