產(chǎn)品內(nèi)容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時(shí)加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時(shí)加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
NADH 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
H2O2過氧化氫檢測試劑盒可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | FS-01S63296 |
商品介紹:
測定意義
H2O2是生物體內(nèi)最常見的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化產(chǎn)生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面,H2O2可以直接或間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸,蛋白質(zhì)等生物大分子,并使細(xì)胞膜遭受損害,從而加速細(xì)胞的衰老和解體;另一方面H2O2也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。
測定原理:
H2O2與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復(fù)合物,在415nm有特征吸收。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、丙酮60mL、濃鹽酸10mL、研缽和冰。
注意事項(xiàng):
1、公司產(chǎn)品僅用于科研操作過程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應(yīng)過程要注意避光。
3、當(dāng)吸光值大于 1 時(shí),建議稀釋后測量,計(jì)算公式中應(yīng)當(dāng)乘以稀釋倍數(shù)。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:收集 500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
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WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)檢測試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)圓弧青霉Guinea pig PI3K (Phosphoinositide-3-Kinase) ELISA Kit
胰淀(IAPP)檢測試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)粗皮側(cè)耳(平菇)Guinea pig PKM2 (Pyruvate Kinase, Muscle) ELISA Kit
核糖核A3(RNASE3)檢測試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)貝萊斯芽胞桿Guinea pig CKB (Creatine Kinase, Brain) ELISA Kit
TATA盒結(jié)合蛋白(TBP)檢測試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)米根霉Guinea pig TACR2 (Tachykinin Receptor 2) ELISA Kit
腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)煙色離褶傘Guinea pig GNβ1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit
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信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子1(STAT1)檢測試劑盒(聯(lián)吸附試驗(yàn)法)芬氏鏈霉Guinea pig RAG-2 (Recombination Activating Gene 2) ELISA Kit
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