產品屬性：
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
NO含量檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63374 |
商品介紹：
測定意義
NO（Nitric Oxide，NO）廣泛分布于生物體內神經、循環、呼吸、消化、泌尿生殖等系統中，特別是神經組織中較豐富。它作為細胞間及細胞內的信息物質，發揮信號傳遞的作用，是一種新型的生物信使分子，在機體的生理、病理過程中起著重要的作用。
測定原理：
NO在體內或水溶液中極易氧化生成NO2—，在酸性條件下，NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物，進一步與萘基乙烯基二胺偶合，產物在550nm處有特征吸收峰，測定其吸光值，可以計算NO含量。為了排除樣品色素等的影響，每個樣品需做對照管。
自備實驗用品及儀器：
天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
產品內容：
公司產品僅用于科研酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
堿性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存
試劑三：粉劑×1 支，-20℃保存，用時加入 1.6mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；
試劑四：粉劑×1 支，4 ℃保存，用時加入 1.9mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；
試劑五：液體 0.7mL×1 支，4 ℃保存；
試劑六：液體 10mL×1 瓶，4 ℃保存；
試劑七：自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
操作步驟：
一、NAD+和 NADH 的提?。?/span>
1、血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。喝?0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min；取上清 200uL，加入等體積堿性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清，冰上保存待測。
NADH 的提?。喝?0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 堿性提取液，煮沸 5min(蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積堿性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
NADH 的提?。悍Q取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 堿性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。菏占?500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。
NADH 的提?。菏占?500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 堿性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。
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聚烯 平均分子量M.W ~1,800 2-氯二甲酮 99%Anti-CCL15/MIP5 巨噬炎性蛋白15
聚烯 平均分子量M.W ~450,0004-氯-4'-羥基二甲酮 98%Anti-CCL16/HCC-4 巨噬炎性蛋白16抗體
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液體石蠟 包埋級2,4-二羥基二甲酮 99%Anti-CCL20/MIP3 alpha 巨噬炎性蛋白20抗體
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6-正基-2-硫代尿嘧 分析標準品2-羥基-4-甲氧基-5-磺二甲酮 98%Anti-CCL24/Eotaxin-2 嗜粒趨化蛋白24抗體
注意事項：
1、操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加，必須分開加。
2、反應過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時，建議稀釋后測量，計算公式中應當乘以稀釋倍數。
