細胞基本屬性:
細胞名稱 | 人附睪管上皮細胞 | 商品貨號 | A01X1382 |
組織來源 | 附睪組織 | 種屬來源 | 人 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 生長特性 | 貼壁培養 |
細胞形態 | 鋪路石樣, 多角形細胞 | 傳代特性 | 細胞特性確定傳代 |
細胞簡介:附睪是一個多數曲折、細小的管子構成的器官,一面連接著輸精管,一面連接著 睪丸的曲細精管。當精子離開睪丸時,就跑到附睪里,繼續生長成熟。附睪管除 貯存精子外還能分泌附睪液,其中含有某些激素、酶和特異的營養物質,它們有 助于精子的成熟。附睪管由黏膜、肌層和外膜組成。其中,粘膜層主要是由粘膜 上皮細胞構成。
培養基:原代上皮細胞培養體系
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%胰dan白酶
培養條件:氣相: 空氣,95%;CO2 ,5%
注意事項:
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
原代細胞培養方法:
1.準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養液。
7.計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養液調整后,分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8.培養:置于36.5℃溫箱培養,如用CO2溫箱培養,瓶蓋需擰松半圈。
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