人DC細胞
細胞簡介:樹突狀細胞 ( Dendritic cells, DC) 是機體功能的專職抗原遞呈細胞 ,它能高 效地攝取、加工處理和遞呈抗原 ,未成熟DC具有較強的遷移能力 ,成熟DC能有 效激活初始型T細胞 ,處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié)。
DC的來源有兩條途徑: ①髓樣干細胞在GM-CSF的刺激下分化為DC ,稱為髓樣 DC ,也稱DCl ,與單核細胞和粒細胞有共同的前體細胞;包括朗格漢斯細胞 , 間 皮 (或真皮) DCs以及單核細胞衍生的DCs等 ,②來源于淋巴樣干細胞 ,稱為淋 巴樣DC或漿細胞樣DC ,即DC2 ,與T細胞和NK細胞有共同的前體細胞。樹突狀 細胞(DC)表面具有豐富的抗原遞呈分子、共刺激因子和粘附因子 ,是功能強大的 專職抗原遞呈細胞(APC)。 DC自身具有免疫刺激能力 ,是目前發(fā)現的惟一能激活 未致敏的初始型T細胞的APC。
培養(yǎng)基:原代樹突狀細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣 ,95%; CO2 , 5%
細胞基本屬性:
細胞名稱 | 人DC細胞 | 商品貨號 | A01X1446 |
組織來源 | 外周血 | 種屬來源 | 人 |
產品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 半懸浮細胞 |
細胞形態(tài) | 傳代特性 | 根據細胞特性傳代 |
原代細胞培養(yǎng)方法:
1.準備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶蓋需擰松半圈。
公司正在出售的產品:
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ECV-304-RFP | 整合αⅤβ3(ITG αⅤβ3)ELISA試劑盒 |
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人神經母細胞瘤細胞 | 組蛋白賴N-甲基轉移SETD7(SETD7)ELISA試劑盒 |
人乳腺癌細胞(熒光) | 胰島抗體(Anti-Ins)ELISA試劑盒 |
注意事項:
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。