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人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞【Human Bone: Articular Chondrocytes】
      產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
實(shí)驗(yàn)事項(xiàng)：
1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。
   建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
   如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

ANP32C 致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體  威爾氏李斯特菌
Adenosine deaminase 腺苷脫氨酶抗體  比基尼鏈霉菌
ASB4 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體  磚紅鏈霉菌
ATRNL1 ATRNL1蛋白抗體  粗糙鏈孢霉
AFP4a AFP4a蛋白抗體  產(chǎn)朊假絲酵母
APBB2 鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體  紅法夫酵母
APBB3 鐵蛋白Fe65樣蛋白2抗體  阿舒多囊霉
APPBP2 β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體  異型酒香酵母
Aph-1b 早老素穩(wěn)定因子樣蛋白/γ分泌酶組件蛋白APH1抗體  乙型溶血性鏈球菌
phospho-AKT1 (Tyr474) 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體 
phospho-AKT1 (Ser473 + Tyr474) 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體  福氏志賀氏菌
ASH1L ASH1L蛋白抗體  痢疾志賀氏菌
ADRA2C α2C-AR腎上腺素能受體抗體
AZI1 中心體蛋白AZI1抗體  陰溝腸桿菌
ALPK3 α蛋白激酶3抗體（心肌）  冰核細(xì)菌
ALOXE3 表皮型脂氧合酶3抗體（魚鱗病相關(guān)蛋白）  大豆根瘤菌
ANKRD28 錨蛋白重復(fù)域28抗體  費(fèi)氏志賀氏菌
AFF4 淋巴細(xì)胞相關(guān)AF4樣蛋白抗體  英諾克李斯特菌
ANKRD12 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體  單增李斯特菌
ANKRD13A 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體  藤黃微球菌
ANKRD9 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體  
ANKS1A 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體  綠膿假單胞菌(綠膿桿菌)
APM2 脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體  停乳鏈球菌
APOL3 載脂蛋白L3抗體  豬霍亂沙門氏菌豬霍亂亞種
ARMC3 (Cancer/testis antigen 81) 腫瘤/抗原81抗體  痤瘡丙酸桿菌
ATXN7L2 共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣2抗體  金針菇
ARS2 鹽耐藥蛋白ARS2抗體  立枯多核菌
ARSA 芳香基硫酸酯酶1抗體  普雷恩毛霉
ASNA1 鹽轉(zhuǎn)運(yùn)三磷酸腺苷酶抗體  雅致放射毛霉＝葡匐放射毛霉
ATXN7L1 共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣1抗體  嬰兒雙歧桿菌
AUTS2 孤獨(dú)癥易感基因2蛋白抗體（自閉癥相關(guān)蛋白1）  普通變形桿菌
ATX2 脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體  熱帶靈芝

小鼠雙鏈DNA(mouse dsDNA) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠多巴胺(mouse Dopamine) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠二胺氧化酶(mouse DAO) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠D-二聚體(mouse D-Dimer) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠β內(nèi)啡肽(mouse β-EP) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠表皮生長因子(mouse EGF) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠表皮生長因子受體(mouse EGF R) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠噬酸性粒細(xì)胞趨化因子(mouse Eotaxin) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠促紅細(xì)胞生成素(mouse EPO) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠紅細(xì)胞生成素受體(mouse EPOR) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(mouse ECP) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽-78(mouse ENA-78) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠血管內(nèi)皮抑素(mouse Endostatin) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠腎上腺素(mouse EPI) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶(mouse eNOS) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠雌二醇(mouse E2) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠促卵泡素(mouse FSH) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠凋亡相關(guān)因子(mouse Fas) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠凋亡相關(guān)因子配體(mouse Fas Ligand) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠酸性成纖維生長因子(mouse a-FGF) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠Fibronectin（mouse Fibronectin） ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠Flt3(mouse Flt3) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠Flt3配體(mouse Flt3 Ligand) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠纖維連結(jié)蛋白(mous FN) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠Fractalkine（mouse Fractalkine） ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)小鼠纖維蛋白原(mouse Fibrinogen) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠Foxp3(mouse Foxp3) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠胃泌素(mouse Gastrin) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon) ELISA 48T/96T 進(jìn)口分裝

注意事項(xiàng)：
1. 接收到，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。