山羊皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒
英文簡稱:Goat cortisol (Cortisol) ELISA kit
產(chǎn)品貨號:KS17400
規(guī)格:96T/48T
品牌:科順生物
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
山羊皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被樣本抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
山羊皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1.酶標(biāo)儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
山羊皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
山羊皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒組成
名稱 96孔配置 48孔配置 備注
微孔酶標(biāo)板 12孔×8條 12孔×4條 無
樣本稀釋液 6mL 3mL 無
檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無
20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說明書進(jìn)行稀釋
底物A 6mL 3mL 無
底物B 6mL 3mL 無
終止液 6mL 3mL 無
封板膜 2張 2張 無
說明書 1份 1份 無
自封袋 1個(gè) 1個(gè) 無
注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度都不相同,麻煩聯(lián)xi客服索取相應(yīng)說明書
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
山羊皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
山羊皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
山羊皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:低檢測濃度小于(參考說明書)
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個(gè)月
山羊皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
KS12107 人胰多肽(PP)ELISA試劑盒
KS12108 犬促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
KS12109 人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒
KS12110 大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒
KS12111 人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒
KS12112 人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒
KS12113 人抗弓形體IgM抗體(anti-toxIgM)ELISA試劑盒
KS12114 人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒
KS12115 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA試劑盒
KS12116 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒
KS12117 人白介素1(IL-1)ELISA試劑盒
KS12118 山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
KS12119 犬孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒
KS12120 大鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒
KS12121 人脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒
KS12122 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒
KS12123 人過敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)ELISA試劑盒
KS12124 兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒
KS12125 人酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒
KS12126 人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒
KS12127 人α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA試劑盒
KS12128 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒
KS12129 雞免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒
KS12130 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C(PIPLC)ELISA試劑盒
KS12131 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒
KS12132 人抑制素(INH)ELISA試劑盒
KS12133 人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒
KS12134 大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒
KS12135 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒
KS12136 植物維生素E(VE)ELISA試劑盒
KS12137 大鼠雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒
KS12138 人紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒
KS12139 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒
KS12140 人膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒
KS12141 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA試劑盒
KS12142 大鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒