土壤酸性蛋白酶試劑盒-微量法規格:100管/48樣
產品內容：
試劑一：液體30mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入5mL 蒸餾水充分溶解待用；
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入50uL 試劑七使粉劑潤濕，然后加入10mL 試劑一， 轉入燒杯中沸水浴磁力攪拌溶解后待用；
試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入50mL 蒸餾水充分溶解待用；
試劑五：液體3mL×1 瓶，4℃保存；
試劑六：液體1.5mL×1 支，0.05mg/mL 標準酪氨suan溶液，4℃保存； 試劑七：液體1.5mL×1 支，4℃保存；
土壤酸性蛋白酶試劑盒-微量法產品說明：
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化，其水解產物是高等植物的氮源之一。S-ACPT 在酸性環境下催化蛋白質水解，與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。
酸性條件下，S-ACPT 可將酪蛋白水解產生酪氨suan；在堿性條件下，酪氨suan還原磷鉬酸化合物生成鎢藍；在680nm 有特征吸收峰。
所需儀器及設備：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、雙蒸水。
土壤酸性蛋白酶試劑盒-微量法操作步驟：
一、測定操作：
1、分光光度計預熱30min 以上，調節波長至680nm，蒸餾水調零。
2、試劑二、三和四 40℃水浴 10min。
3、樣本測定：
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 |
風干土樣（g） | 0.01 | 0.01 |
試劑一（μL） | 50 | 150 |
試劑三（μL） | 100 |
混勻，40℃水浴 30min，振蕩 5-6 次，使土樣與反應液充分接觸
試劑二（μL） | 100 | 100 |
混勻，8000rpm 25℃離心 10min，取上清液，在EP 管或 96 孔板中加入下列試劑
測定管 | 對照管 | 標準管 | |
上清液（μL） | 30 | 30 | |
試劑六（μL） | 30 | ||
試劑四（μL） | 140 | 140 | 140 |
試劑五（μL） | 30 | 30 | 30 |
混勻，40℃水浴 20min，680nm 下讀取各管吸光值 A
注意：標準管只需測一次。每個測定管設一個對照管。
土壤酸性蛋白酶試劑盒-微量法S-ACPT 活性計算：
單位定義：每天每g 土樣中產生1mg 酪氨suan為一個S-ACPT 活力單位。
S-ACPT(U/g)=C 標準×(A 測定管-A 對照管)÷A 標準管×V 反總÷W÷T=48×(A 測定管-A 對照管)÷A 標準管
C 標準管：標準管濃度，0.05mg/mL；V 反總：反應體系總體積，0.2mL；T：反應時間，30min=1/48d；
W：樣本質量，0.01g。
