土壤漆酶試劑盒-微量法注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環境污染物降解和木質纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。
測定原理:
漆酶分解底物 ABTS 產生 ABTS 自由基,在 420nm 處的吸光系數遠大于底物 ABTS,測定 ABTS自由基的增加速率,可計算得漆酶活性。
土壤漆酶試劑盒-微量法自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀。
試劑組成和配制:
試劑一:液體 40mL×1 瓶,4℃保存。
工作液:粉劑×2 瓶,4℃避光保存,臨用前每瓶加 10mL 試劑一溶解。
樣品處理:
新鮮土樣風干,過 30-50 目篩。
土壤漆酶試劑盒-微量法測定操作:
可見分光光度計/酶標儀預熱 30min,調節波長到 420nm,蒸餾水調零。
對照管 | 測定管 | |
樣本(g) | 0.02 | 0.02 |
試劑一(μ L) | 250 | |
工作液(μ L) | 250 | |
37℃震蕩反應 10min,冰浴 5min,10000g,4℃離心 5min,分別取上清 200μ L 于 420nm 處測定吸光值,記為記為 A 對照和 A 測定?!鰽=A 測定-A 對照 |