土壤漆酶試劑盒-可見分光光度法注意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強(qiáng)的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應(yīng)用。
土壤漆酶試劑盒-可見分光光度法測定原理:
漆酶分解底物ABTS 產(chǎn)生ABTS 自由基,在420nm 處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測定ABTS 自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿、震蕩儀,甲苯。
試劑組成和配制:
試劑一:液體100mL×1 瓶,4℃保存。
工作液:粉劑×2 瓶,4℃避光保存,臨用前每瓶加25mL試劑一溶解。
土壤漆酶試劑盒-可見分光光度法測定操作:
分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到420nm,蒸餾水調(diào)零
對照管 | 測定管 | |
樣本(g) | 0.1 | 0.1 |
試劑一(uL) | 1000 | |
工作液(uL) | 1000 | |
30℃震蕩反映10min,冰浴5min,10000g,4℃離心10min,取出800ul反應(yīng)液立即于420nm處測定吸光值,分別記為A1,A2。△ A=A2-A1 |
土壤漆酶試劑盒-可見分光光度法注意事項(xiàng):
1.工作液需臨用前配制,并且盡快使用,4℃保存一周,若變色則不能使用。
2.測定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),若吸光值較高,請將樣品用提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
3.反應(yīng)完立即記錄數(shù)據(jù),以免造成逆向反應(yīng)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。