土壤脂肪酶(S-LPS)試劑盒-可見分光光度法注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
LPS 又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。LPS 廣泛的存在于各種生物中。血清中 LPS 的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。
測定原理：
LPS 催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測定脂肪酸生成速率，即可計算 LPS 活性。
土壤脂肪酶(S-LPS)試劑盒-可見分光光度法自備儀器和用品：
研缽、臺式離心機、震蕩混勻器、可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿、可調式移液槍、甲苯 100mL、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體 90mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 14mL×1 瓶，4℃保存。每次使用前用震蕩混勻器劇烈震蕩 20min。
試劑三：甲苯 100mL×1 瓶，4℃保存（自備）。試劑四：液體 20mL×1 瓶，4℃保存。
標準品：液體 10μL×1 瓶，10 µmol/mL 的標準溶液，4℃保存。臨用前加入 3.168 mL 甲苯，
充分溶解。
樣本處理
建議稱取約 0.1g 土樣，加入 1mL 試劑一進行冰浴勻漿，再用回旋式振蕩器振蕩提取 15min，
4℃，4000g 離心 10min，取上清待測。
土壤脂肪酶(S-LPS)試劑盒-可見分光光度法測定操作：
1.分光光度計預熱 30 min 以上，調節波長到 710 nm，蒸餾水調零。
2.試劑一和試劑二置于 37℃水浴預熱 30min 以上。
3.在 5mL EP 管中依次加入下列試劑
試劑名稱（μL） | 空白管 | 測定管 |
蒸餾水 | 375 | |
樣本 | 125 | |
試劑一 | 750 | 750 |
試劑二 | 250 |
37℃振蕩反應 10 min
試劑三 | 2000 | 2000 |
37℃振蕩反應 10 min 后，8000g，25℃，離心 10min，取上清液
試劑名稱（μL） | 空白管 | 測定管 | 標準管 |
上清液 | 1200 | 1200 | |
標準品 | 1200 | ||
試劑四 | 300 | 300 | 300 |
37℃振蕩反應 5 min 后，靜置 5min，取 800μL 上層液加入 1 mL 玻璃比色皿，于 710nm 處測定吸光值。
注意：空白管和標準管只需測定一次。
土壤脂肪酶(S-LPS)試劑盒-可見分光光度法活性計算公式：
活性單位定義：37℃中每克土樣每分鐘水解橄欖油生成 1μmol 脂肪酸為一個酶活單位。
S-LPS (μmol/min/g 土樣) = [C 標準品×(A 測定管-A 空白管)÷（A 標準管- A 空白管）]×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）÷T
=16×[(A 測定管－A 空白管)÷（A 標準管- A 空白管）]÷W
C 標準品：10 µmol/mL；V 反總：反應總體積，2mL；V 樣：反應中加入樣本體積，0.125mL；
V 樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質量，g；T：催化反應時間，10 min。
