土壤無(wú)機(jī)磷(S-PHOS)試劑盒-可見(jiàn)分光光度法注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定o
測(cè)定意義:
磷是植物必需大?元素o植物K要通過(guò)根系從土壤中獲取磷元素o土壤磷包括有機(jī)磷和無(wú)機(jī) 磷o(hù)土壤有機(jī)磷?過(guò)礦化分解而轉(zhuǎn)化fi無(wú)機(jī)磷,才能進(jìn)一步被植物吸收利用o
測(cè)定原理:
從土壤中提取無(wú)機(jī)磷,在酸性環(huán)境中,通過(guò)鉬藍(lán)法定磷,%afi算出無(wú)機(jī)磷含?o 自備儀器和用品:
a見(jiàn)分光光度f(wàn)isp式離心機(jī)sa調(diào)式水浴鍋,分析天?sa調(diào)式移液器s1mL 玻璃比色皿s蒸餾水和 100 目篩子o
土壤無(wú)機(jī)磷(S-PHOS)試劑盒-可見(jiàn)分光光度法試劑組成和配制:
試劑一:液體×1 瓶,4℃保存o臨用前用蒸餾水稀釋 10 倍后再用o 試劑=:液體×1 瓶,4℃保存o
試劑й:粉劑×1 瓶, 4℃避光保存o臨用前配制,加入 20 mL 蒸餾水,充分溶解后加入 10 mL 試劑=,混勻o
標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1 支,20 µmol/L 無(wú)機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存o 土壤無(wú)機(jī)磷提取:
取 10 mL 離心管,加入精確?取的 100 目篩子過(guò)篩的風(fēng)?土樣約 0.1g,加入 10 mL 提取液, 震蕩混勻,然后置于 40℃水浴浸提 1 h,8000g,25℃,離心 10min,取k清液,待測(cè)o
土壤無(wú)機(jī)磷(S-PHOS)試劑盒-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定步驟:
1. 分光光度f(wàn)i預(yù)熱 30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 660 nm,蒸餾水調(diào)零o 2.打開(kāi)水浴鍋,調(diào)節(jié)溫度到 40℃o
3.空白管:取 EP 管,依次加入 500µL 蒸餾水,500µL 試劑й,混勻后置于 40℃水浴保溫 10min,室溫冷K 10 min 后于 660 nm 測(cè)定吸光度,記fi A 空白管o
4.標(biāo)準(zhǔn)管:取EP 管,依次加入 50µL 標(biāo)準(zhǔn)液,450µL 蒸餾水,500µL 試劑й,混勻后置于
40℃水浴保溫 10min,室溫冷K 10 min 后于 660 nm 測(cè)定吸光度,記fi A 標(biāo)準(zhǔn)管o
5.測(cè)定管:取EP 管,依次加入 50µL k清液,450µL 蒸餾水,500µL 試劑й,混勻后置于
40℃水浴保溫 10min,室溫冷K 10 min 后于 660 nm 測(cè)定吸光度,記fi A 測(cè)定管o 需在 40min 內(nèi)完成比色o
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次o 土壤無(wú)機(jī)磷含?fi算公式:
S-PHOSCnmol/d /g ?重3= [C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測(cè)定管—A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管—A 空白管)]×V 總
÷W= 200×(A 測(cè)定管—A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管—A 空白管)÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)液:20 µ mol/L:V 總:總k清液體?,10 mL=0.01 L:W:土壤樣品質(zhì)?,go
土壤無(wú)機(jī)磷(S-PHOS)試劑盒-可見(jiàn)分光光度法注意事項(xiàng):
1.試劑й需臨用前配制,限當(dāng)天使用o試劑й配制過(guò)程中,a能會(huì)產(chǎn)生黑色固體,其不影響結(jié)果,注意吸取時(shí)不要將黑色固體吸入o
2.40min 內(nèi)完成比色o