名 稱:人粘蛋白21 (MUC21) ELISA試劑盒
規(guī) 格:96T/48T
性 狀:液體
貯 藏:避光防潮保存
包 裝:盒裝
用 途:用于測(cè)定血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性
提 示:我司ELISA檢測(cè)試劑盒僅供科研實(shí)驗(yàn),不得用于其他用途,使用前仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說(shuō)明書
試驗(yàn)原理:
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)(EISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù),該技術(shù)用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔,空白孔加標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液 100μL,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100μL,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育 90 分鐘,為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌,每個(gè)孔中加入生-物素化抗體工作液 100μL(在使用前15 分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育 1 小時(shí)。
3. 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3 次,每次浸泡 1-2 分鐘,大約 350μL/每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4. 每孔加酶結(jié)合物工作液(臨用前 15 分鐘內(nèi)配制)100μL,加上覆膜,37℃溫育30 分鐘。
5. 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5 次,方法同步驟3。
6. 每孔加底物溶液(TMB)90μL,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15 分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色酌情縮短或延長(zhǎng),但不可超過(guò)30 分鐘,當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),即可終止)。
7. 每孔加終止液 50μL,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn),終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物溶液的加入順序相同。
8. 立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD 值),應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序。
9. 實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存。
人粘蛋白21 (MUC21) ELISA試劑盒
實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng):
1、有試劑不能與皮膚直接接觸。
2、務(wù)必使用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準(zhǔn)用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。
3、取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈、擦干后,方可取用另一種試劑。
4、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處。
5、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶?jī)?nèi)。