產品簡稱:
一、產品信息:
中文名稱:人皮膚成纖維細胞
細胞數量:1*10^6
組織來源:人,皮膚
形態特征:成纖維細胞
生長方式:貼壁生長
背景描述:該細胞系為國內建系
培養條件:1640,10%FBS,丙酮酸鈉;空氣95%,二氧化碳5%;37℃培養
換液頻率:2-3天
傳代比例:1:2-1:3
凍存液配方:90%完,全培養基,10%DMSO
安全性:BSL-1
供應限制:僅供科研
運輸方式:常溫運輸(T25培養瓶)
二、培養方式:
1.培養基:HDF-a專用培養基【RPMI-1640+10%FBS+1%P/S】
2.培養環境:37℃、5%CO2
3.傳代培養:當細胞密度達到80%以上時,可以進行傳代,傳代比例1:2~1:4,2~3天傳代一次。
(1)用巴氏滴管吸出細胞培養瓶內的培養基;
(2)加入1ml的PBS,輕輕晃動潤洗細胞,然后將PBS吸出;
(3)加入2ml的胰,酶,輕輕晃動浸潤細胞,然后放在培養箱內消化消化1~2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間);
(4)在顯微鏡下觀察,發現細胞變圓,輕輕晃動細胞便開始脫落,這時可以終止消化;
(5)加入4ml含血清的完,全培養基,用移液器吹打細胞,使細胞脫落并形成單細胞懸液;
(6)將細胞懸液轉移到15ml的離心管,1000rpm離心5min;
(7)離心完成后吸出上清丟棄,再用移液管取10ml完,全培養基將細胞重懸,輕輕吹打混勻;
(8)將細胞懸液分裝到兩個新的T25細胞培養瓶中,放在37℃的CO2培養箱中進行培養。
4.細胞凍存:使用本公司無血清凍存液可直接將細胞凍存在-80℃(無需使用程序降溫盒),細胞在-80℃可保存3年,長期保存建議使用液氮罐。
5.冷凍復蘇細胞:將含有1mL細胞凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL完,全培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
三、質量檢測:
1.STR鑒定:正確
2.細菌檢測:陰性
3.支原體檢測:陰性
四、售后服務:
1.收到細胞后請及時查看瓶身有無破損,是否漏液等現象;
2.用75%的酒精噴灑培養瓶之后,放在培養箱中靜置2-4小時以穩定細胞狀態,然后用顯微鏡觀察細胞狀態并拍照記錄,40倍和100倍照片各一張(細胞在運輸過程中存在少量的漂浮或者死亡屬于正常現象);
3.原瓶中的培養基在細胞傳代之后不建議繼續使用,請配制新的完,全培養基或者購買本公司的專用培養基;
4.建議定期對細胞進行拍照記錄;收到細胞后7天內,對細胞生長狀態有任何問題,可申請售后。
5.強烈建議:在第,一次細胞傳代時,使用附贈或者購買本公司配置的細胞培養瓶將細胞按照1:2進行傳代,可以對比測試自配的培養基是否可以養好細胞。如果有以上任何問題,請及時聯系本公司。