人蛋白聚糖(ACAN;AGC)ELISA試劑盒
品牌:佰利萊
規(guī)格:48t/96t
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1 | R.T. |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | R.T. |
密封袋 | 1個 | 1個 | R.T. |
酶標(biāo)包被板 | 1*48 | 1*96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品:27ng/ml | 0.5ml*1瓶 | 0.5ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml*1瓶 | 1.5ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 3ml*1瓶 | 6ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3ml*1瓶 | 6ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3ml*1瓶 | 6ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3ml*1瓶 | 6ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml*1瓶 | 6ml*1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | ( 20ml*20倍)*1瓶 | (20ml*30倍)*1 瓶 | 2-8℃保存 |
操作流程:
(1)產(chǎn)品僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的工作液100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
人蛋白聚糖(ACAN;AGC)ELISA試劑盒的使用常識:
(1)試劑切忌與手接觸(有些試劑有強腐蝕性、等特性)。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,絕不允許用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,才可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后請及時將瓶放回原處,以免遺忘,帶來不便。
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)(怕產(chǎn)生原試劑的再次污染)。
免責(zé)聲明:
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。
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